食品中蜡样芽孢杆菌检测方法的分析及建立改进方法的研究

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蜡样芽孢杆菌是一种常见的食品污染菌和条件致病菌,与大量的食物中毒事件有关,严重影响人们的身体健康和生命安全。目前在我国相关食品的标准中,并没有明确蜡样芽孢杆菌的限量规定值,造成对该菌的生产控制无法可依,另外由于我国的检测方法与国际方法存在不一致,导致国内外检测结果出现了较大的差异。本课题在新疆石河子地区采集生牛乳、鲜肉、街边小吃及过夜剩米饭4类共40份样品,蜡样芽孢杆菌检测结果显示4类食品中均有检出,40份样品的平均检出率为22.5%,阳性样品中蜡样芽孢杆菌的污染水平从1.5×102 CFU/g(m L)~3.0×105 CFU/g(mL)不等。对国内外蜡样芽孢杆菌的检测方法:GB/T 4789.14-2003、SN/T 0176-2013、EN ISO 7932-2004分别进行分析与研究,结果证明GB检测方法存在容易污染、菌落漫延连接难以计数、菌落生长迅速影响计数准确性、易受杂菌影响检测灵敏性等缺陷;SN检测方法中的MPN计数方法,个别步骤规定不明确,可能会因漏检影响结果的准确,并且该方法的鉴定工作量十分大,检测成本较高;ISO检测方法简单方便,只局限于检测疑似蜡样芽孢杆菌,不能区分蜡样芽孢杆菌与其他十分相近但比较少见的芽孢杆菌,因此可能导致错误和遗漏。通过大量使用API 50 CHB生化鉴定系统获得的经验,可以确认影响该鉴定系统准确性的因素包括培养物的纯度、菌悬液的浓度等,同时,API 50 CHB鉴定系统无法区分蜡样芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌,仍然需要借助蛋白毒素结晶试验来确定。结合国内外相关的蜡样芽孢杆菌检测方法,并参照其他食品卫生微生物学检验和计数方法,建立起改进的蜡样芽孢杆菌检测方法,通过对该方法进行有效性和准确性验证,能够与现行的国内外检测方法达到同样的特异性和准确性,可以用于食品中蜡样芽孢杆菌的检测。与其他检测方法相比较,该改进的方法具有简便、准确、经济的特点,为食品中蜡样芽孢杆菌的检测提供新的思路。
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