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目的:本研究课题以中医理论为指导,采用临床经验方通便汤,基于丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein ki-nase,MAPK)信号通路,观察本方对慢传输型便秘(Slow transit constipation,STC)模型大鼠结肠黏膜水通道蛋白 3(Aquaporin 3,AQP3)、4(Aquaporin 4,AQP4)表达的影响。旨在从分子水平初步探讨通便汤治疗慢传输型便秘的部分作用机制与途径,为便秘的防治提供新的思路和方法,为进一步阐明通便汤治疗慢传输型便秘的分子生物学机制奠定基础。方法:1、造模:将60只大鼠随机分为正常组20只,模型组40只,分别饲喂普通饲料及含复方地芬诺酯的饲料,给药剂量为8mg/kg/d。饲养时间为120天。正常组、模型组各取10只大鼠,根据相应指标,检验造模是否成功。2、实验:将剩余的40只大鼠,分为正常组(生理盐水灌胃+尾静脉注射PBS溶液)、模型组(生理盐水灌胃+尾静脉注射PBS溶液)、通便汤组(通便汤灌胃+尾静脉注射PBS溶液)、通便汤+U0126组(通便汤灌胃+尾静脉注射U0126),每组10只。连续给药4周。给药结束后进行相应指标检测。指标检测:观察大鼠一般情况;24h大鼠粪便形态及数量;粪便含水量;肠道传输功能测定;免疫组化、蛋白印迹、免疫荧光-PCR测定大鼠结肠AQP3、AQP4、MAPK的表达及分布。结果:1、与正常组相比,模型组大鼠各项指标有显著性差异。模型复制成功。2、通便汤组与模型组相比,粪便粒数、粪便含水量、小肠碳墨推进率增加,有统计学差异;结肠残留粪便数减少,有统计学差异;AQP3、AQP4表达下调,有统计学差异。3、通便汤+U0126组AQP3、AQP4、MAPK的表达低于模型组,高于正常组,均有统计学差异。结论:1、慢传输型便秘模型复制成功,复方地芬诺酯安全有效,且模型具有稳定性。2、通便汤能下调AQP3、AQP4,减少肠道水分吸收,改善STC大鼠的症状。3、通便汤可以通过抑制MAPKs下调AQP3、AQP4的表达,从而治疗STC。