【摘 要】
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本研究通过耳蜗器官体外培养模型的建立,观察了低氧对体外培养耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞的毒性作用;应用细胞化学方法、免疫荧光技术、RT-PCR及Western Blot等方法,观察低
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本研究通过耳蜗器官体外培养模型的建立,观察了低氧对体外培养耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞的毒性作用;应用细胞化学方法、免疫荧光技术、RT-PCR及Western Blot等方法,观察低氧条件下,耳蜗细胞形态学变化;检测低氧条件下耳蜗组织中Bcl-2基因家族凋亡蛋白BNIP3、抗凋亡蛋白Bcl-2等的表达状况以及低氧对Caspase-3活性的影响;探讨BNIP3和iNOS之间的关系及SMT对低氧条件下耳蜗毛细胞的作用。从细胞水平、蛋白水平和基因水平探讨低氧条件下耳蜗细胞的凋亡,及各种凋亡因子在细胞凋亡过程中的动态表达规律;并对BNIP3基因在体外培养耳蜗组织低氧过程中的表达及其与低氧的相关性进行探讨。在国内外首次提出BNIP3基因表达参与低氧所致的耳蜗损伤的病理过程;对Bcl-2蛋白家族中凋亡蛋白BNIP3在体外培养耳蜗组织低氧损伤中的作用机制及其与Caspase-3之间的关系进行初步探讨;证实iNOS能够促进低氧时BNIP3诱导的耳蜗细胞凋亡;发现SMT对低氧状态下耳蜗毛细胞有保护作用,这种保护作用以内毛细胞更为明显。从而为低氧导致的耳部疾病的病因、病理和治疗方面的进一步研究提供理论依据和实验参照数据。
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