茶树精油抗菌活性及其安全性研究

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茶树油是近年来发展较快的一种精油,具有广谱的抗菌活性,在国外已被研发成多种类型的产品,如防腐剂、抗菌剂和芳香剂。我国对茶树油的抗菌作用及机理还没有充分了解,其产品的研发相对滞后,为了推动茶树油在我国的开发利用,本研究对茶树油开展质量标准测定、抗菌活性研究、局部刺激性和致敏性、急性经口毒性以及亚慢性毒性作用的研究,结果如下:(1)茶树油质量标准的测定:茶树油的相对密度为0.9011、折光率为1.4815、旋光度为+8.83,pH为5.46;采用薄层色谱法对茶树油的特征组分进行定性测定;采用GC-MS分析方法测定特茶树油征组分的含量,测得1,8-桉叶素含量为1.4%,4-松油烯含量为39.25%。(2)茶树油抑菌试验:茶树油对5种供试菌抑菌效果均属于中度敏感。测得大肠埃希菌和白色葡萄球菌的MIC为1.0%,金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的MIC分别为1.2%、1.4%、2.0%。中和剂鉴定试验,中和剂配方为:4%Tween-80+1.0%卵磷脂+2.0%甘氨酸+PBS,能有效中和茶树油对试验菌残留作用。悬液定量杀灭试验,2.0%的茶树油对绿脓杆菌、大肠埃希菌的杀灭时间20 min;4.0%的茶树油对金黄色葡萄球菌的杀灭时间60 min;茶树油对白色念珠菌和白色葡萄球菌的杀灭浓度为8.0%,作用时间分别为60 min和40 min。(3)一次完整皮肤刺激试验:4只白兔均未出现水肿和红斑表现,茶树油对白兔皮肤无刺激性。一次破损皮肤刺激试验:中低剂量组对白兔皮肤无刺激性;高剂量组对白兔的皮肤有轻度刺激。多次完整皮肤刺激试验:4只白兔均未出现红斑表现,出现轻度水肿,中低剂量组无刺激性,高剂量组有轻度刺激。急性眼刺激试验:茶树油对白兔角膜和虹膜均没有刺激性,对结膜有轻度刺激,会造成结膜充血,但症状在48 h后恢复,属于无刺激性。局部致敏性试验:试验组均未出现皮肤红斑和水肿的情况,皮肤反应评分为0,致敏率为0。(4)茶树油的急性经口毒性试验:采用BLiss法测得茶树油的LD50为2184.2 mg/kg,95%可信限为1940 mg/kg2439.5 mg/kg,茶树油为低毒物质。茶树油的亚慢性毒性试验:ALT、AST和ALP含量同时升高,TP含量降低,说明大鼠存在一定的肝脏和肾脏损伤。试验组MCHC、PDW、P-LCR、MPV、TBIL显著性降低(P﹤0.05),说明大鼠出现了贫血的症状;病理切片可见大鼠肝脏和肾脏出现水肿,脾脏有不同程度的淤血;高剂量组大鼠的脾脏的脏器系数显著性升高。综上所述,高浓度的茶树油对大鼠的肝脏、肾脏和脾脏会产生一定的毒性,对心脏和肺的毒性作用不明显。本研究证实,茶树油具有显著的抗菌活性、低毒安全及无刺激性等优点,具有广阔的市场研发前景。
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