【摘 要】
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目的:通过检测抑肺饮干预下小鼠Lewis肺癌瘤组织中CD34标记的微血管密度（MVD）,肺癌细胞NF-κB信号通路活性及其p65的磷酸化表达水平,探讨抑肺饮抑制肺癌转移的分子机制。方法:体内实验:将70只雄性SPF级C57BL/6小鼠,随机选择10只小鼠作为空白对照组,其余60只小鼠右侧腋窝皮下接种2*106的Lewis肺癌瘤细胞,建立小鼠Lewis肺癌转移模型。24h后随机分为6组,每组10只:
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目的:通过检测抑肺饮干预下小鼠Lewis肺癌瘤组织中CD34标记的微血管密度（MVD）,肺癌细胞NF-κB信号通路活性及其p65的磷酸化表达水平,探讨抑肺饮抑制肺癌转移的分子机制。方法:体内实验:将70只雄性SPF级C57BL/6小鼠,随机选择10只小鼠作为空白对照组,其余60只小鼠右侧腋窝皮下接种2*106的Lewis肺癌瘤细胞,建立小鼠Lewis肺癌转移模型。24h后随机分为6组,每组10只:即模型对照组（予0.9%生理盐水0.4ml灌胃）、中药低剂量组（5g/kg灌胃）、中药中剂量组（10g/kg灌胃）、中药高剂量组（20g/kg灌胃）、顺铂（DDP）组（2mg/kg顺铂腹腔注射）、中药中剂量+顺铂组。灌胃为每天一次,连续14天;腹腔注射为隔日一次,共给药五次。每天观察各组小鼠皮下结节情况及体重变化;第15天脱颈椎处死全部小鼠,完整剥离肿瘤组织并称重,计算各组抑瘤率,免疫组化法测定CD34标记的肿瘤细胞微血管密度（MVD）。体外实验:首先制备抑肺饮含药血清,MTT法对含药血清功能进行评价,选取最适浓度抑肺饮含药血清;应用TNF-α诱导A549细胞发生上皮间质细胞转化（EMT）,给予抑肺饮含药血清,Western blot法检测A549细胞p65的磷酸化表达水平,荧光素酶报告基因法检测NF-κB信号通路启动子基因的活性,从而探明TNF-α/NF-κB信号通路在抑肺饮抑制肺癌转移中的作用。结果:体内实验:抑肺饮可在一定程度上抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长。中药+顺铂组、顺铂组、中药高剂量组、中药中剂量组及中药低剂量组的抑瘤率分别为37.58%、31.79%、31.71%、20.57%、1.25%,且其抑瘤率随中药浓度升高而逐渐升高。中药各组（包括中药+顺铂组）CD34表达与模型组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）,且IOD值随中药浓度升高而逐渐降低。体外实验:TNFa诱导后,A549细胞p65的磷酸化表达水平明显升高,而用抑肺饮干预可明显降低p65的磷酸化表达水平;双荧光素酶报告基因结果显示,抑肺饮对A549细胞NF-κB信号通路活性有明显抑制作用。结论:抑肺饮可以通过抑制肿瘤细胞NF-κB信号通路活性,降低肿瘤细胞中p65的磷酸化表达水平,抑制肿瘤血管生成,从而防止肿瘤转移。
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