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恶性肿瘤作为全球公共卫生问题之一,对人类健康产生严重威胁。作为发展中国家,我国癌症患者的发病率及死亡率均逐年上升。由于已有的化疗药物毒副作用较大,新型抗肿瘤制剂的研发具有重要意义。异喹啉类化合物是一类具有抗癌活性的化合物,但具有水溶解度低,难于吸收,直接给药效果差等缺点。本研究主要对具有异喹啉结构的化合物针对抗肿瘤活性进行筛选,并开发载药系统以提高药物吸收,降低毒副作用。本研究主要包括以下几个方面:1.化合物抗肿瘤活性筛选及理化性质检测本文以11种异喹啉类化合物和α-亚甲基-γ-丁内酯类化合物为筛选对象,通过MTT细胞抑制试验筛选抗肿瘤活性强的化合物。He La、Hep G2细胞IC50实验和HEK-293T细胞抑制试验结果显示,2-[[4-溴-2-(4-溴-苯甲酰)-1-氰基-1,2-二氢-异喹啉-1-基]-(2-溴-苯基)-甲基]-丙烯酸薄荷基酯(化合物2)对肿瘤细胞的抑制作用强,对正常细胞的抑制作用弱,因此选择此化合物作为抗肿瘤药物进行研究。对该化合物的理化性质进行检测,结果表明化合物极难溶于水,在乙醇中的溶解度为1.52 mg/m L,难于直接给药,需要进行制剂的开发。2.脂质体、转铁蛋白脂质体载药系统的建立为了提高细胞对化合物2的吸收,选择了脂质体这一剂型进行制剂开发,同时对脂质体进行转铁蛋白修饰,制备得到转铁蛋白受体靶向的脂质体制剂。对脂质体、转铁蛋白脂质体进行理化性质考察和转铁蛋白浓度、载药量优化,研究结果显示优化得到的脂质体制备条件为LP:Tf=500:1,载药量10%。制备得到的脂质体粒径在77 nm左右,转铁蛋白脂质体粒径在144 nm,电位均在-7~-4 m V范围内,无明显差异。3.脂质体、转铁蛋白脂质体的体外评价本文对制备得到的脂质体和转铁蛋白脂质体载药系统进行体外评价。研究结果发现,通过血清稳定性和体外释放试验发现两种载药系统均能够在血清环境中保持较好的稳定性,且均能达到一定的缓释效果。流式细胞术和激光共聚焦结果显示在两种细胞系中,Tf-LPs的转染效率明显高于LPs,说明对脂质体进行转铁蛋白偶联能够提高肿瘤细胞对化合物的摄取效率。对细胞摄取途径进行研究,结果初步证明了Tf-LPs主要是通过Tf受体介导的内吞途径进入肿瘤细胞。MTT试验结果显示在He La和Hep G2细胞中,Tf-LPs对细胞的抑制作用强于LPs。细胞ROS水平考察和线粒体膜电位变化考察的结果也显示出Tf-LPs能够诱导细胞ROS水平提高,细胞发生凋亡。综上所述,递送新型化合物的转铁蛋白靶向脂质体是一种有潜力的肿瘤治疗药物。筛选得到的有良好抗肿瘤活性的化合物通过转铁蛋白脂质体载药系统的包载能克服原化合物溶解性差,生物利用度低的缺点,达到延长循环时间,肿瘤靶向的作用效果。本文制备的递送新型化合物的转铁蛋白脂质体,可以为今后进一步体内研究等工作打下坚实地基础。