对整合素由内向外激活机制的研究主要集中在β-整合素胞内区的作用上,β-整合素胞内区是相对保守的并且是细胞内激活剂talin和kindlin的结合位点。α-整合素的胞内区近膜端区域与β-整合素近膜端区域共享一个保守的GFFKR基序,并形成了一个特异的界面,使整合素保持静息状态。GFFKR基序之后的α-整合素胞内区远膜端区域在长度和序列上都有差异,它们在整合素激活中的作用没有确定。本实验对αⅡb和β3亚基进行截短、突变,通过可溶性配体结合、LIBS表位暴露、二硫键交联、WB等实验对整合素胞质远膜端区域进行研究。实验证明了α-整合素胞质远膜端区域有助于维持整合素的静息状态和整合素由内向外的激活。α-整合素远膜端区域的完全缺失减弱了 talin和kindlin介导的整合素配体的结合和构象变化。α-整合素远膜端区域有合适的长度和合适的氨基酸是整合素由内向外激活的重要因素。本实验结果数据确定了α-整合素胞内区远膜端区域在整合素激活中的重要作用,并为talin和kindlin如何诱导整合素的构象改变提供了新的见解。在整合素未与配体结合时,胞外区α1/α1’-螺旋在α1/α1’连接处处于弯曲状态。整合素与配体结合后,在配体结合的βI结构域,α1/α1’-螺旋从弯曲构象变成伸直的构象。为了确定高亲和力的配体结合和细胞表面完整的整合素的双向构象传导是否需要α1/α1’-螺旋的构象改变,本实验在胞外区α1/α1’连接处引入突变,通过可溶性配体结合、LIBS表位暴露、细胞黏附与抑制、细胞伸展等实验对其进行研究。实验证明了 α1/α1’连接处保守的甘氨酸,对于维持静息状态下α1/α1’-螺旋的弯曲构象至关重要。促进α1/α1’-螺旋伸展的突变使整合素具有结构性活性;然而,在外部或内部刺激中,阻断α1/α1’-螺旋不弯曲的突变消除了配体的结合。这些突变也阻止了配体诱导的整合素从细胞外的延伸,但对talin诱导的整合素从细胞内延伸没有影响。此外,这些突变型整合素介导的细胞扩散、F-肌动蛋白应激纤维和粘着斑形成,以及粘着斑激酶激活也存在缺陷。实验也证实了 α1/α1’连接的结构作用,它使α1/α1’-螺旋在静止状态呈弯曲,并在整合素激活时通过螺旋伸展传递双向构象信号。