【摘 要】
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目的:研究丙泊酚诱导HO-1蛋白表达抑制氧糖剥夺海马神经元凋亡的机制。方法:将在24孔细胞培养板上培养7d的海马神经元随机分为5组(n=36孔):正常培养组(C1组)、正常培养组+50
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目的:研究丙泊酚诱导HO-1蛋白表达抑制氧糖剥夺海马神经元凋亡的机制。方法:将在24孔细胞培养板上培养7d的海马神经元随机分为5组(n=36孔):正常培养组(C1组)、正常培养组+50μmol/L丙泊酚(Propofol)组(C2组)、氧糖剥夺组(D组)、氧糖剥夺+50μmol/L丙泊酚组(P组)、氧糖剥夺十50μmol/L丙泊酚+10μmol/L锌原卟啉IX(ZnppIX)组(z组)。C1组:培养7天的海马神经元全量换液再继续正常培养24小时。C2组:培养7天的海马神经元接受50μmol/L丙泊酚处理60分钟后,再继续正常培养24小时。D组:培养7天的海马神经元进行缺糖缺氧培养60分钟后复糖复氧,再继续正常培养24小时。P组:海马神经元缺糖缺氧的同时接受50μmol/L异丙酚处理。Z组:在海马神经元进行缺糖缺氧同时加入ZnppIX使其终浓度为10μmol/L后同p组处理。随机取培养7天的24孔板中的6孔海马神经元采用台盼蓝排斥试验进行细胞存活率的检测,随机取正常培养7d的24孔板中6孔海马神经元进行神经元纯度鉴定。每组分别取培养在24孔板中12孔海马神经元,用Hoechst33342染色法检测细胞凋亡,于荧光显微镜下观察细胞凋亡情况,采用免疫细胞化学染色法检测HO-1蛋白和Bcl-2蛋白表达。结果:与C1组比较,C2组海马神经元HO-1蛋白的表达增加,Bcl-2蛋白表达也增加(P＜0.05),凋亡率无变化(P＞0.05)。与D组比较,P组海马神经元HO-1蛋白的表达增加,Bcl-2蛋白表达也增加,凋亡率下降(P＜0.05)。与P组比较,Z组海马神经元HO-1蛋白的表达降低,Bcl-2蛋白表达也降低,凋亡率增加(P＜0.05)。结论:丙泊酚通过诱导氧糖剥夺海马神经元表达HO-1,进而上调Bcl-2,从而抑制氧糖剥夺体外培养的海马神经元的凋亡,可能是丙泊酚神经保护作用的机制之一。
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