优化培养条件下人脂肪干细胞的视网膜神经保护作用的研究

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目的:检测多能成体祖细胞(MAPC)的培养条件对人脂肪干细胞(hADSCs)生长的影响,旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。方法:通过细胞形态观察、MTT实验、克隆形成率、PCR检测、以及成脂、成骨、成软骨分化潜能检测等,研究MAPC培养条件下hADSCs的特征,并用MAPC培养处理的hADSCs进行RCS大鼠视网膜下腔移植,通过视网膜电图(ERG)和TUNEL检测,判断细胞移植治疗对视功能及视网膜细胞凋亡的影响。结果:MAPC培养处理的hADSCs细胞增殖能力及克隆形成率均增强,形成的克隆较大且可稳定传10代以上,且具有成脂、成骨、成软骨的多向分化潜能,细胞表面标记物及细胞因子出现差异表达:CD140b、CD90、CD47、HGF和PEDF显著上调,CD73、CD105和IL-6显著下调。与未治疗的RCS视网膜相比,移植MAPC培养条件处理的hADSCs(P4)3周后,RCS大鼠的B波波幅明显升高,外核层细胞凋亡明显减少。结论:MAPC培养条件处理的hADSCs显示出更好的视网膜神经保护作用,适合用于治疗视网膜退行性疾病。
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