bFGF基因修饰的骨髓间充质干细胞/PLGA复合体对大鼠脊髓损伤的保护作用

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目的观察bFGF基因修饰的BMSCs与PLGA构成的复合体对大鼠脊髓损伤的治疗效果,为临床治疗脊髓损伤提供实验室依据。方法240只T7半横切脊髓损伤大鼠随机平均分成四组:A组移植bFGF-BMSCs+PLGA,B组移植bFGF-BMSCs,C组移植BMSCs,D组为对照组。术后第3d、第2、3、8和12w时,各组随机取12只大鼠先行BBB运动功能评分及SEP监测;后处死大鼠并取损伤区脊髓组织,6只用于RT-PCR检测bFGF基因mRNA的表达,6只用于免疫组化检测NF-200、GAP-43、GFAP的表达及HE染色行形态学观察。结果(1)BBB评分结果:2w之前各组BBB评分均小于2分,差异无统计学意义(P>0.05);3w以后各组评分恢复加快且A组评分高于其它各组,12w时各组分别达到14、11、9、8分;各组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)SEP监测结果:术前所有大鼠均可监测到SEP,术中SEP显示达到潜伏期延长10%或波幅降低50%的脊髓损伤标准,术后3w之前所有大鼠均监测不到SEP,8w之后各组只有部分大鼠能监测到SEP,统计数据不全。(3)RT-PCR结果:2w时B组bFGF mRNA表达高于其他各组且达高峰,之后呈下降趋势;3w时A组bFGF mRNA的表达高于其他各组且达高峰,之后保持较高表达水平;C组及D组处于较低的表达水平;2w后各时间点组间差异有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化结果:2w时B组NF-200、GAP-43、GFAP阳性细胞个数多于其它各组且达高峰,之后呈下降趋势;3w时A组阳性细胞数量多于其它各组且达高峰,之后保持在较高的水平,2w后各时间点组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。(5)HE染色结果:2w之前,各组损伤区脊髓组织缺损明显,周边出现片状出血,可见各种炎症细胞浸润,神经元胞体萎缩,胶质细胞反应性增生及脊髓空洞形成;3w时,损伤周边脊髓结构破坏严重,神经纤维排列紊乱,并可见瘢痕形成;8w以后损伤周边明显胶质瘢痕形成,D组严重于其他各组。结论大鼠脊髓半横切损伤后,单纯BMSCs移植可在一定程度上促进神经再生及运动功能恢复,移植bFGF-BMSCs可改善治疗作用,而移植bFGF-BMSCs+PLGA复合体可进一步提高治疗效果。
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