目的:通脉醒脑滴丸是防治脑缺血卒中的中药复方制剂,具有活血化瘀,醒脑开窍的作用。本实验研究目的在于考察通脉醒脑滴丸对脑缺血卒中的防治作用,并探讨其可能的作用机理,为其在临床上的应用提供药理学依据。方法:采用大鼠线栓阻断大脑中动脉法、二血管夹闭加低血压法复制脑缺血再灌注模型,以及小鼠结扎双侧颈总动脉和迷走神经造成脑缺血模型、断头造成脑缺血模型,观察通脉醒脑滴丸对实验性脑缺血模型的保护作用;观察药物对小鼠凝血时间、体内血栓形成和对小鼠软脑膜微循环的影响,考察药物抗血栓和对微循环的作用;选用小鼠常压缺氧、亚硝酸钠致中毒缺氧模型,验证药物抗缺氧损伤的作用;测定模型大鼠脑组织匀浆SOD、MDA、GSH-Px和NO等生化指标,考察药物对自由基过氧化损伤的作用。采用荧光定量PCR方法测定脑组织PI3K、Akt、PTEN的表达,通过免疫组化方法测定脑组织HIF-1α和VEGF的表达,考察药物对PI3K/Akt信号通路的作用;通过免疫组化方法,测定脑组织bcl-2、Bax、CytC和Caspase-3的表达,考察药物对Caspase-3通路的作用。结果:通脉醒脑滴丸对脑缺血损伤具有明显的防治作用,能够减少脑缺血大鼠脑梗死比率,减轻脑水肿,改善神经系统症状,改善脑组织病理表现;能延长缺血缺氧后小鼠的存活时间;能延长凝血时间,减少体内血栓形成,改善小鼠软脑膜微循环;能提高脑缺血再灌注大鼠SOD和GSH-Px活性,减少了MDA、NO的含量;能上调PI3K、Akt、HIF-1α以及VEGF的表达,下调PTEN的表达,在脑缺血后细胞存活通路的激活和上调中发挥作用;还能下调神经细胞的促凋亡基因Bax、Caspase-3、CytC表达,对脑缺血后细胞凋亡通路有负调作用。结论:上述研究初步证实通脉醒脑滴丸对脑缺血损伤具有保护作用,其机制可能与参与PI3K/Akt细胞存活通路的激活和上调,以及负调Caspase-3介导的细胞凋亡通路有关。