雌激素残留检测技术的研究与应用

来源 :宁波大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangkaihao_2008
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随着工业社会的繁荣发展,人类日益暴露在雌激素环境中,雌激素直接或间接地对人类与动物造成不同程度的危害,甚至导致癌变死亡。2000年,国家自然科学基金委员会以“环境类激素影响人类健康的机理”为重点项目予以招标,在我国正式启动了对环境激素类物质的大规模研究。而到目前为止,有关雌激素的检测手段还比较单一,多渠道、多角度、快速、灵敏的检测手段有待进一步开发与加强,以便实现对雌激素的长效监控。本论文从以下几个方面展开研究工作:一、本研究利用高效液相(HPLC)色谱法来实现对雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌素酮、乙烯雌酚的精确灵敏检测。在优化色谱条件下,建立以上5种雌激素的标准曲线,且R2≥0.9992。并利用该方法对同一组样品进行5次平行实验,确定其相对标准偏差在2.5%以内。且分别以鸭、鹅、鱼进行不同浓度的加标实验,实验结果表明不同加标浓度,其加标回收率均在87.1%~103.5%之间。并且本实验对来自浙江、江苏5个不同地区的鸭、鹅、鱼15个样品进行检测分析。以上实验结果表明,该方法灵明度高,回收率好,重现性强,且样品制备较简单,因此适用于水禽及水产品中雌激素的检测。二、基于薄层石墨烯优异的导电性及生物兼容性及表面吸附性,构建了基于薄层石墨烯的酪氨酸酶生物传感器。本研究首先利用化学还原法制备了薄层石墨烯,并利用透射电镜(TEM),选区电子衍射(SAED)对其进行表征。然后将薄层石墨烯、壳聚糖、酪氨酸酶按一定比例混合,制备石墨烯-酪氨酸酶-壳聚糖电极(GR-Tyr-CS/GCE)。在优化pH及温度等检测条件后,电流-时间法(I-T)测得双酚A(BPA)的浓度线性范围为7.5×10-8~2.5×10-6mol L-1,相关系数R2=0.997,检测限为:2.18×10-8mol L-1(信噪比S/N=3)。这项工作将为BPA残留提供灵敏、快速、简便的检测方法。三、基于石墨烯-金复合物的生物兼容性、表面吸附性及优异的电子传输性,以及酪氨酸酶对BPA的催化氧化还原作用,构建了基于石墨烯/金的酪氨酸酶生物传感器。利用透镜(TEM)、拉曼(Rama)、能谱(EDS)等技术表征石墨烯/金复合材料,并制备石墨烯/金-酪氨酸酶-壳聚糖电极(GR/Au-Tyr-CS/GCE)。在一定浓度的BPA溶液中进行循环伏安扫描,优化底液pH及温度等检测条件,利用差分脉冲伏安法(DPV)测得BPA的浓度线性范围为2.5×10-8~3×10-6mol L-1,线性回归方程为Ip=3.156C+11.437,相关系数R2=0.998,检测出现为1.64×10-8mol L-1(信噪比S/N=3)。该项工作可用于BPA痕量分析。
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