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目的建立海人酸点燃癫痫大鼠模型,通过避暗试验观察海人酸点燃癫痫模型大鼠不同时间段学习记忆功能,检测神经生长相关蛋白(neuronal growth associated protein,GAP-43)在海人酸点燃癫痫模型大鼠海马组织中的表达,探讨GAP-43与学习记忆之间的关系。方法1.海人酸点燃癫痫大鼠模型的建立与学习记忆相关性研究：选6-8周龄健康雄性SD大鼠,体重220-250g。随机将大鼠分为海人酸点燃癫痫模型1d组(模型1d组)、海人酸点燃癫痫模型7d组(模型7d组)、海人酸点燃癫痫模型30d组(模型30d组),假手术组和空白对照组(n=24)。模型1d组、模型7d组和模型30d组均用5μl微量注射器经注药套管给予1μl新鲜配置的海人酸(0.4mg·ml-1);假手术组同模型组手术方式,只注入生理盐水,排除手术对大鼠学习记忆的影响；空白对照组,在每次刺激实验组的大鼠时以相同的方法刺激抓取1-2次即可,以排除认为刺激对大鼠的影响。采用避暗试验方法记录各组大鼠实验潜伏期(LT)及来回穿梭次数(EN),研究其学习及空间记忆功能。2.大鼠海马GAP-43的表达与学习空间记忆的关系：大鼠单笼饲养,避暗试验后,无外界刺激无痛处死。模型1d组、模型7d组和模型30d组避暗试验后于1d,7d,30d时间点无痛处死大鼠,免疫组化、RT-PCR和Western blot技术检测海马组织中GAP-43蛋白及mRNA的表达。结果1.海人酸点燃癫痫大鼠模型的建立与学习记忆相关性研究结果：海人酸点燃癫痫模型大鼠制作成功后大鼠有认知改变表现,检测大鼠脑电波可收集典型的脑电波活动模型,模型制作成功率为95.6%。模型1d组避暗试验结果的LT(53.72±3.51s)、EN为(3.69±1.17次)；模型7d组避暗试验结果为LT(44.51±1.28s)、EN为(4.15±1.18次)；模型30d组避暗试验结果LT为(37.66±3.43s)、EN为(5.44±0.49次),假手术组避暗试验结果LT为(53.14±3.11s)、EN为(3.55±1.51次),空白对照组避暗试验结果LT为(55.33±3.28s)、EN为(3.65±1.52次)。与假手术组相比,模型7d组和模型30d组学习能力显著降低(P<0.05,P<0.01)；模型组组间比较,模型1d、7d、30d组大鼠学习功能逐渐减弱,结果有统计学意义(P<0.05,P<0.01),假手术组与空白对照组无差异性。2.分子生物学检测显示(1)免疫组织化学结果：GAP-43免疫组织化学染色阳性结果表现为海马细胞胞质成棕黄色,集聚在细胞膜周围。与假手术组相比,模型1d组、模型7d组和模型30d组GAP-43免疫阳性细胞数显著降低(P<0.05,P<0.01)；与模型1d组相比,模型30d组GAP-43免疫阳性细胞数显著降低(P<0.01)。(2)反转录聚合酶链式反应(Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)结果：在Marker的对照下目的条带清晰可见。通过测定各条带的光密度值,与GADPH管家基因比值校对,与假手术组相比,模型1d组、模型7d组和模型30d组GAP-43mRNA表达显著降低(P<0.05)；与模型1d组、模型7d组相比,模型30d组GAP-43mRNA表达显著降低(P<0.01)；模型1d组与模型7d组间无显著差异。(3)免疫印迹分析(Western blot)结果：各个组大鼠海马中GAP-43蛋白均有表达,在标准蛋白分子参照物Marker的对照下,通过测定各目的条带的光密度值,与β-actin管家基因蛋白比值校对,与假手术组相比,模型1d组、模型7d组和模型30d组GAP-43蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)；与模型1d组、模型7d组相比,模型30d组GAP-43蛋白表达显著降低(P<0.01)；与模型7d组相比,模型30d组GAP-43蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论1.海人酸点燃癫痫可使大鼠学习记忆认知功能受损。2.海人酸点燃癫痫大鼠海马组织中GAP-43表达的下调可能是其认知功能受损的分子机制之一。