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目的:近来,在较发达国家肝硬化发病率及死亡率不断上升,为最常见的死因。肝纤维化作为慢性肝病发展为肝硬化的必经病理过程,其是一个可逆的过程,早期干预及治疗对肝脏疾病发生发展至关重要。但目前无针对肝纤维治疗的特效药物,所以以肝纤维化病因学为出发点,了解肝纤维发生发展机制对治疗和预防肝纤维化具有十分重要的意义。本研究旨在探讨肠道菌群和Beta2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠr)与肝纤维化的关系。首先围绕肝纤维化小鼠肠道菌群变化展开研究,继而分析β2-GPⅠ、核因子-KB(nuclear factor-KB p65,NF-κB p65)、血浆活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)及血浆凝血因子XI活性(activity of coagulation factor XI,FXIa)变化,探讨倡导菌群和β2-GPⅠ与肝纤维化的相关性。同时,分析肝硬化患者及正常健康人血清β2-GPⅠ及血浆APTT、PT及FXIa变化,探讨β2-GPⅠ与肝纤维化的关系。方法:1、动物实验:(1)小鼠肝纤维化模型的建立:16只BALB/c小鼠随机分为2组(正常对照组、肝纤维化组),用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)及花生油混合物腹腔注射构建小鼠肝纤维化模型。(2)取样:8周后处死小鼠并取其血液、肝脏组织及肠道内容物。(3)检测样本:检测小鼠真址清转氨酶水平、血清β2-GPⅠ水平、血浆APTT、PT及FXIa;分析肝组织病理变化、Western Blot检测肝组织β2-GPⅠ、NF-κB p65表达情况;运用I-Sanger生物数据分析平台进行小鼠肠道菌群多样性分析。2、临床实验:收集肝硬化患者及正常健康人血液标本各50份,检测分析血清β2-GPⅠ水平及血浆APTT、PT及FXIa情况。3、统计学方法:用SAS 9.2软件统计分析结果。计量资料结果用均数±标准差((?)±s)表示,R检验用于确定显著差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、动物实验:(1)肝纤维化组小鼠丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平较正常对照组显著升高(P<0.001),γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyltransferase,γ-GGT)在两组小鼠中无显著性差异。肝组织组化染色显示肝纤维化组小鼠肝小叶破坏、肝细胞凋亡和炎症细胞增殖明显,胶原沉积显著增加,表明肝纤维化模型成功建立。(2)肝纤维化组小鼠肠道群落Alpha多样性降低,肠道菌群失调,表现为毛螺菌丰度显著下降,放线菌门、脱硫弧菌等肠道菌丰度显著升高(P<0.05)。(3)肝纤维化组小鼠血清(β2-GPⅠ水平较正常对照组显著减低(P<0.05),肝组织β2-GPⅠ表达在正常对照组及肝纤维化组间无显著性差异;NF-κB p65表达水平在两组间无显著性差异,而磷酸化NF-κB p65(P-NF-κB p65)在肝纤维化组表达明显上调(P<0.05)。APTT、PT在两组小鼠间无显著差异,肝纤维化组小鼠血浆FXIa明显减低。2、临床实验:肝硬化患者血清β2-GPⅠ水平较正常健康人明显减低,血浆FXIa明显减低,PT明显增高(P<0.05),血浆APTT在两组中无显著差别。结论:1、肝纤维化小鼠肠道菌群Alpha多样性降低,肠道通透性增高,肠道菌群失调。2、肠道菌群的失调可能通过微生物相关分子模式(microbial associated molecular patterns,MAMPs)引起β2-GPⅠ的下调,NF-κB p65激活,与肝纤维化发生相关。血浆FXIa明显减低而不影响APTT,这将为临床血栓治疗提供新思路。