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研究一血管瘤病理分期的年龄分布及普萘洛尔的疗效观察目的：通过比对血管瘤各期病理结构与年龄分布的差异,以及普萘洛尔对血管瘤的疗效观察。探讨血管瘤病理分期与年龄分布的关系,评价口服普萘洛尔对血管瘤的治疗效果。方法：1.收集天津市儿童医院外科2009年1月至2011年1月手术切除的血管瘤组织蜡块80例。予组织行HE染色,按染色结果分析血管瘤病理分期与患儿年龄分布的关系。2.收集天津市儿童医院整形外科2010年1月至2013年1月收治的婴儿血管瘤121例,其中男48例,女73例。回顾性分析口服普萘洛尔对血管瘤的治疗效果。结果：1.HE染色结果可见：血管瘤增殖期主要分布于(0-1岁)患儿,消退期主要分布(1-5岁)患儿,消退完成期主要分布于(5-11岁)患儿。(P<0.05,差异有统计学意义)。2.疗效观察：所有患儿服药后48小时以内均可见瘤体不同程度减小,张力下降,颜色变浅,服药1周之内变化较为显著。随访3-5个月疗效评定：Ⅳ级主要为(0-1岁)患儿,Ⅲ级主要为(1-2岁)患儿,II级主要为(2～3岁)患儿,I级主要为(3-5岁)患儿。(P<0.05,差异有统计学意义)。结论：1.血管瘤增殖期处于0-1岁,随后进入消退期及消退完成期。2.普萘洛尔对增殖期血管瘤疗效显著,对非增殖期血管瘤疗效不佳。3.普萘洛尔对增殖期细胞有抑制作用,然而其作用机制目前尚不清楚。4.普萘洛尔为β受体阻滞剂,其对增殖期细胞的抑制作用是通过β1受体还是β2受体,亦或是两种β受体同时受抑制有待进一步的研究。研究二β受体阻滞剂对血管内皮细胞增殖的影响目的：通过比对三种β受体阻滞剂：选择性β1受体阻滞剂美托洛尔、广谱β受体阻滞剂普萘洛尔、选择性β2受体阻滞剂丁氧胺分别对增殖期HUVEC的作用差异,探索β受体阻滞剂是通过阻滞β1受体还是β2受体,抑或是二者同时,抑制血管内皮细胞的增殖。方法：1.培养、鉴定人脐静脉血管内皮细胞2.采用MTT法检测浓度为20μg/ml的三种β受体阻滞剂：美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺对HUVEC细胞株增殖的影响。比对三种药物组间细胞活性抑制率的差异。3.采用ELISA法检测浓度为20μg/ml三种β受体阻滞剂：美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺对HUVEC细胞株VEGF、MMP-9浓度的影响。比较VEGF、MMP-9的浓度在三组间的差异。结果：1.经鉴定所培养的细胞为HUVEC。2.MMT结果显示：HUVEC经三种p受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺作用24后,均可抑制血管内皮细胞的增殖,美托洛尔组细胞活性抑制率为20.06%±0.051,普萘洛尔组细胞活性抑制率为48.07%±0.029,丁氧胺组细胞活性抑制率为35.69%±0.046。三种药物组间比较,普萘洛尔组细胞抑制率较丁氧胺组增加；丁氧胺组细胞抑制率较美托洛尔组增加。(P<0.05,差异具有统计学意义)。3. ELISA结果显示：HUVEC经正常培养基和三种fβ受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺作用24小时后,VEGF在对照组浓度为58.073±3.351pg/ml,美托洛尔组为54.291±1.082pg/ml,普萘洛尔组浓度为49.448±1.041pg/ml,丁氧胺组浓度为51.916±1.626pg/ml。MMP-9在对照组浓度为0.253±0.026ng/ml,美托洛尔组为0.129±0.022ng/ml,普萘洛尔组浓度为0.026±0.016ng/ml,丁氧胺组浓度为0.054±0.009ng/ml。与对照组相比较,三种药物组的VEGF、MMP-9浓度均下降。其中,普萘洛尔组较丁氧胺组的VEGF、MMP-9浓度下降明显,丁氧胺组较美托洛尔组下降明显。(P<0.05,差异具有统计学差异)。结论：1.三种β受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺均可以抑制脐静脉血管内皮细胞的增殖。2.三种β受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺均可以降低脐静脉血管内皮细胞VEGF、MMP-9的浓度。3.β受体阻滞剂对血管内皮细胞的增殖抑制作用由β1、β2受体共同起作用,且β2受体的作用比β1受体更强。研究三β受体阻滞剂诱导HUVEC凋亡的研究目的：通过比对三种β受体阻滞剂：选择性pl受体阻滞剂美托洛尔、广谱β受体阻滞剂普萘洛尔、选择性p2受体阻滞剂丁氧胺分别对增殖期HUVEC早期凋亡率的作用差异,探索p受体阻滞剂是通过阻滞p1受体还是p2受体,抑或是二者同时,诱导血管内皮细胞凋亡。旨在初步探讨β受体阻滞剂治疗血管瘤的作用机制。方法：1.传代培养人脐静脉血管内皮细胞,选择3-6代对数生长期细胞进行实验。2.运用流式细胞仪检测浓度为20μg/ml的三种p受体阻滞剂：美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺对HUVEC细胞株早期凋亡率的影响。结果：1.人脐静脉血管内皮细胞生长良好,24-48小时即可传代一次。2.流式细胞仪检测结果显示：HUVEC经正常培养基及三种β受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺作用24后,对照组细胞凋亡率为9.41%±0.53,美托洛尔组细胞凋亡率为12.44%±0.24,普萘洛尔组细胞凋亡率为27.14%±0.56,丁氧胺组细胞凋亡率为18.82%±0.91。与对照组相比较,三种药物组细胞早期凋亡率均有所增加,萘洛尔组细胞的凋亡率高于丁氧胺组；丁氧胺组凋亡率高于美托洛尔组。(P<0.05,差异具有统计学意义)。结论：1.三种β受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔、丁氧胺均可以诱导脐静脉血管内皮细胞的凋亡。2.β受体阻滞剂诱导血管内皮细胞的凋亡由β1、β2受体共同起作用,且β2受体的作用比β1受体更强。3.三种β受体阻滞剂可能通过同时抑制β1、β2受体,诱导内皮细胞凋亡来治疗血管瘤,其中p2受体作用更明显。