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近年来,睡眠剥夺状态被认为与抑郁症的发生密切相关,慢性睡眠剥夺是引起抑郁症的重要风险因素之一,而抑郁症的一个常见症状就是失眠。中药多酚类物质——绿原酸被发现具有较好抗抑郁作用。基于上述研究基础,本文采用小平台水环境方法造大鼠睡眠剥夺应激及ACTH诱导抑郁样大鼠模型,并给予中药多酚绿原酸进行干预;利用行为学、脏器指数、血清单胺类递质和激素及细胞因子等常规药理学指标,还结合尿液GC-MS分析代谢组学研究,从整体上系统地认识和评价绿原酸对大鼠睡眠剥夺应激及抑郁模型干预作用。本研究的主要实验内容和结果如下: 1.绿原酸对睡眠剥夺应激的影响 采用改良“小平台水环境法”建立大鼠睡眠剥夺应激模型。通过敝箱实验,糖水偏好实验,验证大鼠睡眠剥夺应激模型建立成功。根据肾上腺、胸腺和脾脏等脏器指数,血清中IL-2和TNF-α细胞因子水平,血清中INS、TSH、CRH和ACTH激素水平,考察睡眠剥夺对机体的行为表现、免疫功能及激素水平等方面的影响,表明绿原酸具有抗睡眠剥夺作用。采用尿液GC/MS代谢组学方法,结合PLS-DA多维及K-W单维统计分析,系统地评价睡眠剥夺应激对大鼠代谢网络的影响,探索绿原酸的抗抑郁作用机制主要是通过能量代谢及氨基酸代谢等发挥作用。 2.绿原酸对ACTH造抑郁样模型大鼠的影响 采用皮下注射ACTH建立大鼠抑郁模型。通过敞箱实验,糖水偏好实验,强迫游泳及悬尾实验验证大鼠抑郁症模型建立成功。肾上腺、胸腺和脾脏等脏器指数,血清中IL-6和TNF-α细胞因子水平,血清中INS、TSH、CRH和ACTH激素水平及单胺类神经递质(5-HT、DA及NE)水平,考察睡眠剥夺对机体的行为表现、免疫功能、激素及单胺类递质水平等方面的影响,从结果中可以看出绿原酸具有抗抑郁症的作用。采用尿液GC/MS代谢组学方法,PLS-DA多维及K-W单维统计结果说明,系统地评价抑郁症对大鼠代谢网络的影响,绿原酸干预对抑郁大鼠代谢模式的具有较好的回归效果,其作用机制主要是通过能量代谢及氨基酸代谢发挥作用。 本实验首先建立大鼠睡眠剥夺应激模型及ACTH造抑郁样大鼠模型,经绿原酸干预后,在通过常规药理学指标显示模型建立成功,且绿原酸具有一定的抗睡眠剥夺应激和抗抑郁作用。同时采用GC/MS尿液代谢组学方法,探索绿原酸的抗睡眠剥夺应激和抗抑郁作用机制主要是通过能量代谢、氨基酸代谢发挥作用。