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目的:以大鼠尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)法复制脓毒症大鼠模型,以异丙酚、地塞米松以及二者联合应用进行早期干预,观察干预前后肝Toll样受体4/髓样分化蛋白-2(Toll-likereceptor4/Myeloid differentiation Protein-2,TLR4/MD-2)基因表达的差异,为脓毒症器官保护提供依据。方法:100只健康、雄性SD大鼠(泸州医学院动物实验中心提供),其中80只采用大鼠尾静脉注射脂多糖法复制脓毒症大鼠模型,另外20只健康大鼠为正常对照组(N组)。实验分组:将80只脓毒症大鼠随机分为LPS组(L组),LPS+异丙酚组(LP组),LPS+地塞米松组(LD组),LPS+异丙酚+地塞米松组(LPD组),每组20只。每组再依照注射相应药物后1h、2h、4h、8h随机分为T1、T2、T4、T8四个亚组,每组5只(n=5)。实验步骤:L组:静脉注射LPS10mg.kg-1及等量生理盐水；LP组:静脉注射LPS10 mg.kg-1和异丙酚5 mg.kg-1,继以异丙酚5 mg.kg-1.h-1的速度使用微泵持续静脉泵注至处死时间点；LD组:静脉注射LPS10 mg.kg-1+地塞米松0.1 mg.kg-1；LPD组:静脉注射LPS10 mg.kg-1+地塞米松0.1 mg.kg-1+异丙酚5 mg.kg-1,继以异丙酚5 mg.kg-1.h-1的速度使用微泵持续静脉泵注至处死时间点；N组:静脉注射生理盐水10ml。各组分别于处死动物后留取肝脏标本,以半定量逆转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)及相关软件分析不同组TLR4 mRNA,MD-2 mRNA表达。另留取肝组织用10％福尔马林磷酸盐缓冲液固定24h后石蜡包埋、切片,HE染色光学显微镜下观察肝脏组织病理情况。结果:1、TLR4基因相对表达量及分析结果:(1)正常对照组大鼠肝组织可见少量TLR4 mRNA表达；(2)L组注射脂多糖后1小时TLR4 mRNA表达明显升高,之后渐下降(aP<0.05；dp<0.05)；(3)LD组、LP组、LDP组在各时间点同L组比较,其结果显示肝TLR4 mRNA表达明显降低,但同正常对照组比较升高(aP<0.05；bP<0.05；dp<0.05)。各组组内比较显示肝TLR4 mRNA表达均于1小时明显升高,之后渐下降；(4)LDP组在各时间点同LP组、LD组比较,LDP组TLR4mRNA表达量明显下降(cP<0.05),且LDP组在2h后抑制TLR4mRNA表达的作用更强(eP<0.05)。2、MD-2基因相对表达量及分析结果:(1)正常对照组大鼠肝组织可见少量MD-2 mRNA表达；(2)L组注射脂多糖后1小时MD-2 mRNA表达明显升高,之后渐下降(aP<0.05；dp<0.05)；(3)LD组、LP组、LDP组在各时间点同L组比较,其结果显示肝MD-2 mRNA表达明显降低,但高于对照组水平(aP<0.05；bp<0.05；dp<0.05)。各组组内比较显示肝MD-2 mRNA表达均于1小时明显升高,之后渐下降；(4)LDP组在各时间点同LP组、LD组比较,LDP组MD-2 mRNA表达量明显下降(cP<0.05)。3、脓毒症大鼠肝脏TLR4 mRNA与MD-2 mRNA表达的相关分析结果表明TLR4 mRNA与MD-2mRNA表达具有显著正相关(r=0.461,P=0.041)。4、HE染色观察肝组织形态学改变:对照组肝小叶结构完整清晰,肝细胞形态结构正常,肝窦清晰,窦内皮细胞、库普弗细胞均未见明显变化。汇管区小叶间动静脉、小叶间胆管结构清晰,未见炎细胞。L组可见肝细胞明显肿胀、胞浆疏松,肝小叶结构紊乱,窦腔内有炎细胞聚集,门脉区有较多炎细胞浸润,肝窦间隙变宽,偶见点状坏死。上述变化在药物干预后表现有所减轻。结论:1、正常大鼠肝组织内可见少量TLR4、MD-2 mRNA表达,LPS可迅速上调肝组织中TLR4/MD-2基因的表达；2、地塞米松、异丙酚干预后,TLR4/MD-2 mRNA表达明显下调,两药联用对脓毒症大鼠有明显保护作用；3、肝组织中TLR4/MD-2基因的表达与早期脓毒症的发生、发展密切相关,两种基因的mRNA表达呈显著正相关,动态监测TLR4/MD2 mRNA改变对脓毒症的发病及治疗具有一定的指导意义；
4、脓毒症时肝组织主要表现为肝窦区受累为主的损伤,异丙酚、地塞米松能减轻脓毒症时肝组织的炎症损伤。