裙带菜中岩藻多糖的制备工艺及其降血糖活性研究

来源 :浙江工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:bj20089
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裙带菜(Undaria pinnatifida)是一种大型可食用海藻,具有较高的药用和经济价值。它含有多种活性物质,其中岩藻多糖是近年来最受关注的一类活性物质。岩藻多糖主要由岩藻糖和硫酸基团组成,具有较好的药理学活性,如抗氧化、抗肿瘤和抗病毒活性等。而裙带菜中岩藻多糖的规模化制备,尤其是具有较好生物活性的岩藻多糖的制备,仍然是岩藻多糖类功能产品开发过程中的一个重要瓶颈。本文通过单因素和响应面实验对裙带菜中岩藻多糖的提取工艺进行了优化,对百克级岩藻多糖的提取条件和工艺稳定性等进行了考察。然后将岩藻多糖进行分离纯化,对得到的分级组分进行初步的结构分析,最后探究了岩藻多糖的降血糖活性。研究结果如下:(1)利用水提法提取裙带菜中岩藻多糖,对提取时间,温度和料液比进行单因素实验,然后在单因素试验的基础上利用软件Design Expert 8.0设计并进行三因素三水平响应面试验优化这三个提取条件,最终得出最佳的提取条件,即提取温度为100℃,提取时间为4 h,料液比为1:40。在此基础上,用氯化钙提取法和水提法建立了裙带菜中岩藻多糖百克级的制备工艺,共得到钙提岩藻多糖(Up C)820 g和水提岩藻多糖(Up W)183.6 g,得率分别为1.2%和1.3%。同种提取方法得到的不同批次的岩藻多糖分子量分布曲线差异较小。按照《中华人民共和国水产行业标准(SC/T3404-2012)》中的相关标准对得到的各批次岩藻多糖进行检测,从检测的结果来看两种制备岩藻多糖的工艺稳定性良好。(2)利用DEAE-FF琼脂糖凝胶柱对得到的两种岩藻多糖Up C和Up W进行进一步的分离纯化,用水、0.5 M、1.0 M和2.0 M的Na Cl溶液分别对钙提和水提岩藻多糖依次洗脱,分别得到Up C-1、Up C-2、Up C-3和Up W-1、Up W-2、Up W-3六个岩藻多糖分级组分,它们的产率分别为25.5%、18.8%、5.0%和32.5%、14.2%、1.69%。Up C-1主要由葡萄糖、半乳糖和岩藻糖组成,Up C-2和Up W-1主要由甘露糖、半乳糖和岩藻糖组成,Up C-3、Up W-2和Up W-3主要由半乳糖和岩藻糖组成,其中Up C-3不含糖醛酸,其余多糖都含有糖醛酸。从分子量曲线来看,Up C-1与Up W-1的分子量不均一,Up C-2、Up C-3、Up W-2、Up W-3的分子量分别为510 KDa、425 KDa、764 KDa、766 KDa。从红外图谱中可以分析得到,它们的糖链中可能都含有α-糖苷键。Up W-1中的硫酸根可能是连接在糖的C2或C3位上,Up C-1的硫酸根可能是与C4上的-OH垂直连接的。(3)动物实验表明,前期大量提取的Up W1可以缓解高脂饮食引起的小鼠体重增加,提高小鼠的葡萄糖耐量和降低小鼠的胰岛素耐量,从而降低了代谢综合征小鼠的血糖浓度,说明Up W1具有一定的降血糖活性。综上所述,本文建立了一条制备百克级具有降血糖活性裙带菜岩藻多糖的工艺路线,并对其进行了分离纯化和结构表征,为后续规模化生产和相关的岩藻多糖类功能产品开发奠定了基础。
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