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目的:检测核心1β1,3-半乳糖基转移酶(Core 1β1,3-Galactosyltransferase,C1GALT1)在胃癌组织中的表达水平,通过沉默MGC-803胃癌细胞的C1GALT1,观察对其恶性生物学功能的影响。本研究旨在确定C1GALT1表达在胃癌演进过程中的作用。方法:1.通过荧光定量PCR反应验证了C1GALT1反应特异性。2.运用RT-PCR和Western blot检测方法,分别检测46例胃癌组织及其对应的癌旁组织中C1GALT1 mRNA和C1GALT1蛋白的表达状况。3.运用RT-PCR和Western blot分别检测胃癌细胞系SGC-7901,MGC-803,BGC-823及正常胃黏膜细胞系GES-1中C1GALT1 mRNA和C1GALT1蛋白的表达状况。4.利用C1GALT1-siRNA序列转MGC-803细胞,设置C1GALT1-siRNA转染组、质粒空载体组及空白对照组,用Western blot检测各组C1GALT1蛋白的表达状况,并运用MTT实验、体外细胞迁移实验、体外细胞侵袭实验明确各组MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果:1.荧光定量PCR反应后制作的C1GALT1溶解曲线图显示在90度附近有一单一峰,这表明PCR反应特异性高,产物单一,无引物二聚体等杂质生成。2.RT-PCR结果显示:(1)36例C1GALT1mRNA在胃癌组织中表达较配对癌旁组织增高(foldchange=3.91±3.61),10例无差异(foldchange=0.95±0.34)。(2)利用卡方分析结果显示χ2=2.504,P=0.114,结果表明C1GALT1 mRNA在淋巴结转移及未转移胃癌组织中的表达无明显差异。(3)使用spearman双变量相关性分析C1GALT1mRNA表达与胃癌临床分期的关系,结果显示,r=0.761,P<0.001。表明C1GALT1mRNA表达与胃癌发展进程正相关。(4)C1GALT1mRNA在SGC-7901,BGC-823,MGC-803胃癌细胞系中的表达明显高于正常胃黏膜细胞系GES-1(foldchange>3.2,P<0.001)。3.Western blot结果显示:(1)C1GALT1蛋白在37例胃癌组织中的表达高于癌旁组织(foldchange=3.78±1.28,P<0.001),在9例无差异(foldchange=0.85±0.15)。(2)利用卡方分析比较C1GALT1蛋白在淋巴结转移及未转移胃癌组织中的表达情况,结果显示χ2=6.08,P=0.014,结果具有明显差异。(3)使用spearman双变量相关性分析C1GALT1蛋白表达与胃癌胃癌临床分期的关系,结果显示,r=0.329,P<0.026。表明C1GALT1蛋白表达与胃癌发展进程正相关。(4)C1GALT1蛋白在SGC-7901,BGC-823,MGC-803胃癌细胞系中的表达较正常胃黏膜细胞系GES-1特异性升高(foldchange>1.73,P<0.05)。4.利用特异性C1GALT1-siRNA序列转染MGC803细胞,FAM荧光提示转染率达90%以上。5.设置C1GALT1-siRNA转染组、质粒空载体组及空白对照组,经Western blot检测转染组中C1GALT1蛋白表达显示灰度为0.432+0.0413,明显低于Ctrl-siRNA组(0.812+0.0221)与未转染组(0.853+0.0132)(P<0.05)。6.MTT、体外细胞迁移与侵袭实验:与对照组相比,MGC803细胞经C1GALT1-siRNA转染后,增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论:1.胃癌组织中C1GALT1 mRNA表达明显高于对应癌旁组织,并可能与胃癌的临床分期呈正相关。2.胃癌组织中C1GALT1蛋白表达明显高于对应癌旁组织,并与胃癌的临床分期呈正相关。3.C1GALT1可能促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学行为。