目的:1.观察单克隆抗体Herceptin对Her-2/neu表达阳性和阴性胃癌细胞体外增殖作用的影响,探讨其在胃癌治疗中的应用价值。2.评价Herceptin与化疗药物奥沙利铂联合作用于胃癌细胞时,是否存在协同作用,并确定最佳合用顺序,从而为临床治疗提供实验依据。方法:1. RT-PCR检测人胃癌细胞株NCI-N87,SGC-7901 Her-2/neu的表达情况。2. CCK-8法测定单纯Herceptin、单纯化疗组以及Herceptin联合化疗不同方案组对人胃癌细胞的抑制率。3.流式细胞仪检测Herceptin、OXA单用或联合对人胃癌细胞周期分布和凋亡的影响。4.原位末端标记法检测各实验组细胞的凋亡比例。5. Western blot检测Herceptin单用及联合OXA对两种细胞AKT、pAKT、NF-κB蛋白表达的影响。结果:1.人胃癌细胞株NCI-N87 Her-2/neu呈高表达,而SGC-7901 Her-2/neu无明显表达。2. Herceptin单独作用,无论对NCI-N87还是SGC-7901细胞都没有观察到明显杀伤作用。3. Herceptin联合奥沙利铂对SGC-7901细胞没有疗效提高作用,对NCI-N87细胞当先用化疗药后用Herceptin时有明显的疗效提高作用。4. Herceptin单用或联合奥沙利铂均能不同程度得抑制NCI-N87细胞pAKT的表达、联合化疗时能提高NF-κB蛋白表达,而所有药物单用及联合均不影响AKT的表达。结论:Herceptin单用对胃癌细胞没有体外杀伤作用,但是联合奥沙利铂对Her-2/neu过表达胃癌细胞有明显的杀伤性增强作用而且存在最佳联合方案。