补肾通窍方对糖尿病大鼠下丘脑神经元中SS和NOS表达的影响

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目的:观察补肾通窍方对链脲佐菌素致糖尿病大鼠下丘脑视上核(so)、室旁核(pa)两区域中神经元生长抑素(SS)和一氧化氮合酶(NOS)表达的影响,研究该方保护糖尿病大鼠下丘脑神经元的作用,为临床应用和进一步研究补肾通窍方提供客观的实验和理论依据。  方法:将健康雄性SD大鼠适应性饲养一周后随机分为四组,每组9只:正常对照组(正常组);糖尿病模型组(模型组);中药补肾通窍方治疗组(中药组);盐酸二甲双胍治疗组(西药组)。采用高脂高糖饲料喂养加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)15mg/kg(共注射两次)制作糖尿病大鼠模型,中药组自造模前15天起每天给予补肾通窍方20g/kg生药量灌胃至成模后第四周,西药组自成模后第一天起每天给予盐酸二甲双胍药液0.13g/Kg剂量灌胃,其余两组灌服等量生理盐水。每周固定时间测定各组大鼠的体重、空腹血糖1次。成模后第4周末行灌注固定,取脑组织做连续冰冻切片,用免疫组化SABC法,检测下丘脑so、pa中SS的表达水平;用NADPH-d细胞组化法检测下丘脑so、pa中NOS的表达水平。运用显微测微尺计数0.01mm2中的阳性神经元数目作为阳性细胞密度。组间差异比较采用t检验。  结果:①造模成功后,正常组大鼠与模型组、西药组、中药组相比,体重增加(P<0.01),血糖增高(P<0.01)。  ②模型组大鼠下丘脑so和pa两个核区中SS免疫阳性神经元密度均明显低于正常组、西药组、中药组(P<0.01),模型组NOS阳性神经元密度亦比其它三组少(P<0.01)。  ③随着饲养时间的延长,在治疗一个月后,中药组体重较西药组增加,但无明显差异(P>0.05),血糖较西药组下降明显,亦无明显差异(P>0.05),中药组大鼠下丘脑so和pa两个核区中SS免疫阳性神经元密度均明显高于西药组(P<0.01),NOS阳性神经元密度亦高于西药组,但差异无显著性(P>0.05)。  结论:补肾通窍方能上调链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠下丘脑so、pa区域中SS和NOS阳性细胞密度的表达,保护下丘脑神经元,进而改善糖尿病高血糖等临床症状。因此推测补肾通窍方在防治糖尿病神经并发症上具有良好的疗效。
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