ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖分化与凋亡的影响

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体脂过度沉积能够降低胴体的瘦肉率,进而影响肉质品质。体脂沉积是前体脂肪细胞增殖和分化的结果,前体脂肪细胞凋亡也影响体脂沉积。因此,研究前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的调控机理能够为控制体脂沉积提供理论基础,为家畜育种和动物生产提供参考。本实验以生长发育正常、健康状况良好的20 日龄雄性SD 大鼠为实验动物,以前体脂肪细胞培养为基础研究了不同浓度ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖、分化与凋亡的影响。利用MTT 比色分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。结果表明,高浓度(10-4、10-5 和10-7 mol/L)的ATRA 抑制大鼠前体脂肪细胞的增殖(P<0.01),抑制效果随ATRA浓度的升高而增强;低浓度(10-7 和10-8 mol/L)的ATRA 促进大鼠前体脂肪细胞的增殖(P<0.01),促进效果随ATRA 浓度的升高而减弱。通过测定前体脂肪细胞中AgNORs 平均面积的变化,分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞增殖活性的影响。结果显示,前体脂肪细胞硝酸银染色后,AgNORs 呈黑色或棕褐色小颗粒,位于核仁和细胞核内,细胞核呈淡黄色,细胞质不着色。在整个培养过程中,前体脂肪细胞的增殖活力先降低,而后升高,最后降到最低点。高浓度(10-4、10-5 和10-6 mol/L)ATRA 处理组前体脂肪细胞的增殖活性小于对照组,而低浓度(10-7和10-8 mol/L)ATRA处理组前体脂肪细胞的增殖活性大于对照组。利用油红O 染色提取法检测了ATRA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。结果表明, 10-4、10-5 和10-6 mol/L ATRA抑制前体脂肪细胞的分化(P<0.01),抑制效果随ATRA浓度的升高而增强;10-7 和10-8 mol/L ATRA促进前体脂肪细胞的分化(P<0.01),促进效果随ATRA 浓度的升高而减弱。利用吖啶橙荧光染色和免疫组化SP 法分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2 表达的影响,结果表明5×10-5 和10-5 mol/L ATRA 促进促凋亡基因Bax的表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2 的表达,诱导大鼠前体脂肪细胞凋亡。ATRA 的浓度不同,对大鼠前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的影响也不同,进一步研究不同浓度ATRA调控大鼠前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的机理,能够为控制体脂沉积提供理论基础。
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