背景与目的 褪黑素(melatonin，MT)是松果体分泌的一种神经内分泌激素，广泛分布于体内多种器官，且具有广泛的生物学作用，对生物的昼夜节律，性成熟与生殖，免疫反应，肿瘤，应激，衰老，凋亡等均有作用。有研究表明，它可随年龄的增长而下降，其下降可导致机体的衰老，引发多种老年性疾病的发生。有学者认为褪黑素为天然的抗衰老激素。切除松果体可促进机体的衰老进程，外源补充褪黑素或将青年小鼠的松果体移植入老年小鼠体内可延长小鼠寿命，并延缓各种生理功能的减退，因此提出褪黑素具有抗衰老、抗老年性聋的功能。 研究表明，D-半乳糖在体内可氧化产生大量自由基，使机体抗氧化酶活力下降，过氧化产物累积，还可造成组织细胞中半乳糖醇堆积中毒导致代谢紊乱，最终加速机体衰老，并诱导体内多器官发生衰老性疾病。本实验以D-半乳糖制造老年性聋模型并改进其方法，观察褪黑素对豚鼠老年性聋模型形态及功能方面的作用，旨在探讨一种理想的老年性聋造模方法和褪黑素对衰老内耳的保护作用及机制。 郑州大学2002年硕士研究生毕业论文 褪黑素桔抗豚鼠老年性聋的实验研究 方法 本实验选用健康豚鼠共80只。取20只随机分为4组： 正常对照组及三个不同剂量卜半乳糖（15O、20O、300。g／kg）造 模的老年性聋模型组。观察各组动物ABR阈值和I、Ill波潜伏期 及波间期的变化；测定肝组织超氧化物歧化酶u）活性；耳蜗 及蜗核冰冻切片，观察螺旋神经节细胞和蜗核神经细胞改变及脂 褐素沉淀情况。余60只动物随机分为5组：正常对照组，老年性 聋模型组，老年性聋加褪黑素组mT两个剂量：1．0屿八g和 0．3mg／kg），老年性聋加 Vi iC组。以腹腔注射卜半乳糖帘造老 年性聋模型，分别观察各组动物实验前后ABR改变；测定耳蜗匀 浆组织谷耽苦肽－过氧化物酶①SH干X）的含量；耳蜗铺片，掳琅 酸脱氢酶组化方法染色GDH）观察毛细胞损伤情况。 结果 卜半乳糖各剂量组ABRJ波潜伏期较对照组均显著 延长，肝组织 SOD活性有不同程度显著下降，仅 300mg八g组卜 Ill波间期延长，ABR阈值升高卯刃．05）。冰冻切片见对照组螺 旋神经节细胞与蜗核神经细胞密集，染色均匀，尼氏小体分布正 常，螺旋神经节细胞旁未见脂褐素颗粒。老年性聋模型组螺旋神 经节细胞与蜗核神经细胞稀少、肿胀，尼氏小体减少，内皮细胞 增生，螺旋神经节细胞核旁可见大量脂褐素颗粒。 老年性聋模型组用药后ABR阈值明显升高，I＊ 波潜伏期及 波间期显著延长k狈．05）。MTI．0屿八g组与对照组相比无显著 性差异（P＞0．05）。MTO．3。g／kg组和VitC组之间无显著性差异、。，，。u＞0．05人 但这两组与模型组和对、照组相比均有显著性差异 －（P＜0．05）。耳蜗匀浆组织GSH－Px含量皿。二omg／kg组与对照组无 显著性差别u川．05），余各组GSH干X含量较对照组均显著下降 2卯刃．05人耳蜗铺片结果，对照组和皿．omg八g组基底膜各周外毛细胞排列整齐，大小一致，未见缺失，胞内颗粒染色均匀，余实验组毛细胞排列不整齐，大小不一，胞内颗粒染色变浅，分布不均，可见细胞点状缺失，以模型组缺失最多。 结论1．对卜半乳糖制造老年性聋模型在给药途径及剂量上进行了改进，为研究老年性聋提供了一种实验动物造模的方法。2．褪黑素可维持老年性聋豚鼠1J 波潜伏期及波间期的相对稳定，降低ABR阈值。3．褪黑素对老年性聋豚鼠耳蜗毛细胞有保护作用，且与剂量有关。4．VitC作为抗氧化剂对老年性聋的保护作用有限。