论文部分内容阅读
目的:本实验研究干扰素(IFN-ε)和小剂量阿糖胞苷(Ara-C)单独和联合应用对CML急变细胞株K562细胞(Ph染色体阳性细胞)的诱导凋亡作用。方法:K562细胞株在体外培养至对数生长期时,将实验分为9组:未用药组(对照组)、IFN-ε500U/ml组、IFN-ε1000U/ml组、IFN-ε2000U/ml组、Ara-C 0.02 mmol/ml组、Ara-C 0.04 mmol/ml组、Ara-C 0.08mmol/ml组、Ara-C 0.02mmol/ml +IFN-ε500U/ml组、Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml联合组作用K562细胞72h后,用瑞氏-姬姆萨染色后高倍显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术观察细胞凋亡水平。作用K562细胞24、48、72h后,RT-PCR检测不同实验组Survivin基因的表达情况。结果:干扰素(IFN-ε)和小剂量阿糖胞苷(Ara-C)单独和联合应用K562细胞72h后,可见K562细胞皱缩、体积变小,胞质致密,细胞间连接减少,细胞碎片呈簇状分布于细胞周围。随着药物浓度的增高,凋亡细胞的数量也增多。Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml联合组作用K562细胞72小时后,可见核固缩、核仁裂解和凋亡小体。IFN-ε2000U/ml组和Ara-C 0.08 mmol/ml组细胞凋亡率分别为18.92%、19.42%,Ara-C 0.08mmol/L + IFN-ε2000U/ml联合组凋亡率为59.53%,较对照组和单独实验组细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。单独用药组和联合用药组均能下调Survivin基因的表达水平,且随着浓度的增加其表达水平亦降低(P<0.05)。Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml联合组Survivin基因表达水平较单独用药组和对照组均明显降低(P<0.01)。结论:IFN-ε与Ara-C单独及联合应用均可诱导K562细胞凋亡,且存在剂量与时间依赖性;通过Survivin mRNA的表达下降可能是其诱导凋亡的机制。Ara-C可增强IFN-ε对K562细胞的杀伤作用。