【摘 要】
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黄花苜蓿具有抗旱、耐寒、耐盐碱等优良特性,是苜蓿抗性育种的重要种质资源,也是十分重要的基因库。NAC转录因子是植物中特有的转录因子家族之一,在植物生长发育、成熟以及适
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黄花苜蓿具有抗旱、耐寒、耐盐碱等优良特性,是苜蓿抗性育种的重要种质资源,也是十分重要的基因库。NAC转录因子是植物中特有的转录因子家族之一,在植物生长发育、成熟以及适应逆境胁迫中发挥重要作用。本研究克隆获得了黄花苜蓿MfNAC35基因启动子区序列,分析发现其含有抗逆调节相关作用元件。Real-time PCR分析显示MfNAC35在黄花苜蓿根部的表达量较大,在茎中的表达量较少,且在根、茎、叶中的表达均被盐和干旱胁迫上调。酵母实验结果显示MfNAC35具有转录激活功能,且功能域位于蛋白的C端。以植物双元表达载体pBI121(35S-NOS)为骨架,构建超表达载体pBI121(35S-MfNAC35-NOS),利用农杆菌介导叶盘转化法转化本氏烟草,PCR鉴定筛选获得15株T0代转基因植株,RT-PCR分析显示MfNAC35已在T0代转基因植株中获得表达,且盐或干旱胁迫可调节烟草抗逆相关基因CAT、SOD、P5CS表达的上调,初步表明MfNAC35可能是通过调节抗逆相关基因的表达,进而参与调节抗逆性的分子机理。
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