Lf2芽孢杆菌芽孢形成条件及萌发条件研究

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本研究的对象为前期分离得到的一株经实际验证可高效降解生活污水COD的芽孢杆菌Lysinibacillus fusiformis(Lf2菌),为进一步优化该菌剂的生产和应用工艺,本文对其芽孢形成条件和芽孢萌发条件进行了研究。经显微形态观察,25h之前,Lf2菌体形态从小球状变为细长杆状再过渡为短杆状;25h后,菌体变短且一端开始膨大,折光率显著增加。此过程与芽孢传统的生长过程十分相似,其膨大部分将最终发展成为芽孢。在Lf2芽孢杆菌的未经优化的发酵过程中,0-9h为延迟期,9-33h为对数期,33h之后为稳定期菌体最大数达2.45×109个/mL左右。营养体在21h时达到最大值2.03×109个/mL,之后逐渐减少;芽孢在41h时达到最大值2.30×109个/mL,之后基本保持稳定,芽孢转化率达到了93.87%.根据Lf2菌芽孢形成条件的优化实验可知:37℃处理能够显著增加Lf2菌的芽孢数至2.812×109个/mL,增幅达22.26%;pH6处理时可使Lf2菌芽孢数量至2.69×109个/mL,增幅达16.96%;浓度为64ppm的双氧水处理时可使芽孢数量至2.55×109个/mL,增幅达10.87%。正交实验表明40℃、pH 5.5和72ppm的双氧水的组合处理效果最显著,41h时芽孢达到最大值2.95×109个/mL,比优化前提高了28.26%。根据Lt2菌芽孢萌发条件的优化实验可知:初始pH5时比其它pH条件更快进入对数期,可比优化前提前2-3h;温度为37℃时比其它温度条件更快进入对数期,可比优化前提前7h:初始ORP为85mv时比其它ORP条件更快进入对数期,可比优化前提前9h;正交实验表明34℃、pH5.5和ORP80mv组合时能最快进入对数期,比优化前提前11h。
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