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目的:肺感染/肺炎系自发性脑出血(sICH)最常见并发症之一,但对其发病及预后相关因素研究尚少。因感染性疾病与免疫功能密切相关,本文假设脑出血相关肺炎(sICHAP)与患者早期淋巴细胞减少,免疫功能受到抑制相关。并推测淋巴细胞减少,可导致气道内菌群结构改变,促进肺感染的发生。方法:1、纳入天津医科大学神经外科重症监护病房于2018年1月至2019年12月收治符合标准的sICH患者。将患者是否发生肺感染分为肺感染组(PG)和非肺感染组(NPG)。比较两组发病第1天(D1L)及第4天(D4L)的淋巴细胞绝对值,通过Logistic多因素回归分析确定影响sICHAP的因素。通过ROC曲线计算出D4L预测肺感染的临界值,并进一步分为淋巴细胞低组及高组,分析D4L高低与住院时间及短期预后的关系。2、筛选并纳入2019年1月至2020年2月天津医科大学总医院神经外科重症监护病房收治符合标准的sICH患者。取外周血检测发病第4天淋巴细胞亚群及细胞因子的情况。在首次诊断sICHAP时,纳入肺感染组(LSPG),治疗周期内无肺感染发生,则纳入非肺感染组(LSNPG)。比较两组间淋巴细胞亚群及细胞因子的变化,分析与sICHAP的关系。3、将2016年1月至2018年12月天津医科大学总医院神经外科重症监护病房收治的sICH患者进行筛查,纳入符合标准的sICH患者,留取患者入院48小时内的下呼吸道痰液送检,且该痰液细菌培养未发现有效病原菌感染,作为感染前组(PreG)的样本库;当考虑患者存在sICHAP时,留取合格的痰标本分成两份,一份送检痰培养,作为痰培养组(CulG)样本库;另一份存入-80℃冰箱,作为测序组(GenG)样本库。待CulG结果回报阳性且D4L<1000×106/L时纳入GenG样本,挑选出GenG质量最高的相应PreG样本,采用单盲法一并送检基因公司进行 16Sr RNA基因检测,分析sICHAP前后气道内的微生态变化,评估与CulG样本的一致性,并通过对比PreG及相应GenG样本,分析伴有D4L减少并明确诊断的脑出血后肺感染患者气道内微生态的变化。结果:1、本部分共纳入178例病例(PG 134,NPG 44)。sICHAP时间为2.5(2,4)天。两组D4L L比较有显著性差异(P<0.001),PG组D4L显著降低,中位数仅为0.84×109/L。D4L是sICHAP的保护性因素(P<0.05),OR值为 0.412(95%CI 为 0.192-0.885)。患者 D4L 预测患者无 sICHAP 的 AUC 为0.75(95%CI 为 0.669-0.824),最佳界值为 0.805×109/L,敏感度为 90.9%,特异度为49.3%。以D4L是否大于0.8×109/L为界分为高组(D4L>0.8×109/L,n=111)及低组(D4L<0.8×109/L,n=67)。两组相比,D4L 高组 GOS 较高,结果有显著性差异(P<0.001)。2、本部分纳入30例病例(LSPG20,LSNPG 10)。sICHAP时间为2(2,3)天。两组D4L L比较有差异有统计学意义(P<0.001)。LSPG细胞毒性T细胞(CD8+T细胞,Ts)显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),辅助T细胞(CD4+T细胞,Th)与细胞毒性T细胞比值(Th/Ts)差异有统计学意义(P<0.05)。Th、Ts、BL、NK及Treg绝对值在LSPG组均有显著的下降,两组间比较均有显著性差异(P<0.05)。IL-6及IL-10在LSPG里明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3、本部分入组12例,男9女3,鲍曼不动杆菌3例,肺炎克雷白1例,金黄色葡萄球菌3例,铜绿假单胞杆菌5例。选择铜绿假单胞菌的5例的PreG样本。所有GenG样本在门纲目科属水平均可检测到与CulG样本痰培养结果一致的物种。PreG及GenG样本的序列质量、OTU数量及物种数量在门纲目科属水平差异均无统计学意义(P>0.05)。两组样本的Alpha多样性分析相比差异均无统计学意义(P>0.05)。两组样本纲目科属水平铜绿假单胞菌所在物种γ-变形杆菌纲-假单胞菌目-假单胞菌科-假单胞菌属中所占的比率差异均有统计学意义(P<0.05)。乳杆菌目-链球菌科-链球菌属及巴斯德氏菌目-巴斯德氏菌科-嗜血杆菌属及未分类杆菌属所占的百分比在GenG样本中显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);而奈瑟菌目-奈瑟菌科-奈瑟氏菌属所占的百分比在GenG样本中则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:D4L是sICHAP的独立保护性预测因素。当D4L低于0.8×109/L时,患者短期预后更差。sICHAP患者第4天外周血的淋巴细胞亚群普遍下降,尤以细胞毒性T细胞为著,提示sICHAP可能与患者免疫功能下降有关。D4L减少可以作为sICHAP高危预测指标。16S rRNA能够准确的反应sICHAP患者气道内的群落结构。伴有D4L减少的sICH患者在48小时内,即可能有sICHAP的发生。