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目的:癌症的发生发展是一个多步骤的过程,在这个过程中,细胞突变积累并导致增殖、迁移、侵袭及凋亡等方面的异常。口腔癌是全球主要的公共卫生问题,在人类恶性肿瘤中排名第六,5年死亡率接近50%,其中90%为鳞状细胞癌（口腔鳞状细胞癌,oral squamous cell carcinoma,OSCC）,占头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC）新增病例的43.8%,占死亡病例的37.8%。口腔癌的特点是起病隐匿,诊断困难,发展迅速,常伴有转移。美国国立综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network,NCCN）指南中建议对早期肿瘤患者进行手术,对晚期肿瘤患者进行手术及明确的同步放化疗,但OSCC的复发率仍为30%,且以局部复发为主。因此,寻找OSCC准确诊断和有效治疗策略成为当前的迫切需要。随着肿瘤在上皮内的进展,潜在的基质发生变化,基质细胞的数量（如成纤维细胞、巨噬细胞和周细胞）随着肿瘤的进展而增加。Serpin肽酶抑制剂clade H成员1（SERPINH1,也称为HSP47）属于Serpin超家族,是正确折叠和分泌胶原蛋白所必需的分子伴侣。SERPINH1的异常表达与多种癌症密切相关,在我们目前的工作中,通过分析癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库发现,SERPINH1在OSCC中异常表达,但其具体调控机制目前尚不清楚。因此,本研究通过分析SERPINH1在OSCC发生发展中的作用,研究其对于OSCC细胞的生长及迁移等方面的影响,并通过生物信息学分析及细胞生物学实验的验证,进一步确认调控其变化的相关micro RNA,并探讨SERPINH1在OSCC发生发展中的分子机制。研究方法:1、通过GEO数据库的GEO2R分析发现OSCC中的差异表达基因;2、UALCAN数据集分析SERPINH1在OSCC中的表达与预后;3、通过Western Blot和Real Time PCR研究SERPINH1在OSCC细胞系中的表达;4、HE染色观察临床样本的病理情况;5、免疫组化观察SERPINH1在OSCC临床样本中的表达;6、通过Western Blot和Real Time PCR研究SERPINH1在OSCC临床样本中的蛋白及基因表达;7、通过MTT研究SERPINH1表达下调对OSCC细胞的增殖的影响;8、通过划痕实验和Transwell实验观察SERPINH1表达下调对OSCC细胞迁移的影响;9、通过DAPI染色观察SERPINH1表达下调对OSCC细胞凋亡的影响;10、通过PI单染流式细胞术观察SERPINH1表达下调对OSCC细胞周期的影响;11、Target Scan生物信息学数据库进行靶点预测,研究SERPINH1上游的潜在调控因子;12、Linked Omic数据库研究miR-29c在OSCC发生发展中的相关性及并对SERPINH1的调控情况;13、通过Real Time PCR研究miR-29c在OSCC细胞系中的表达;14、荧光素酶双报告基因检测研究miR-29c与SERPINH1的靶向调控关系;15、MTT实验研究miR-29c的过表达及SERPINH1过表达对OSCC细胞增殖的影响;16、通过划痕实验和Transwell实验观察miR-29c的过表达及SERPINH1过表达对OSCC细胞迁移的影响;17、通过DAPI染色观察miR-29c的过表达及SERPINH1过表达对OSCC细胞凋亡的影响;18、通过PI单染流式细胞术观察miR-29c的过表达及SERPINH1过表达对OSCC细胞周期的影响。结果:1、GEO数据库GEO2R分析发现OSCC中的差异表达基因SERPINH1高表达;2、UALCAN数据集分析发现SERPINH1在OSCC中高表达并与预后不良有关;3、Western Blot和Real Time PCR发现SERPINH1在OSCC细胞系中的高表达;4、免疫组化显示SERPINH1在OSCC临床样本中高表达;5、Western Blot和Real Time PCR显示SERPINH1在OSCC临床样本中,蛋白及基因均高表达;6、MTT显示SERPINH1表达下调抑制了OSCC细胞的增殖;7、划痕实验和Transwell实验均表明SERPINH1表达下调使OSCC细胞迁移受到了抑制;8、DAPI染色显示,SERPINH1表达下调使OSCC细胞凋亡增加;9、PI单染流式细胞术显示,SERPINH1表达下调使OSCC细胞停滞于S期的细胞增多;10、Target Scan生物信息学数据库进行靶点预测,确定SERPINH1上游的潜在调控因子是miR-29c;11、Linked Omic数据库miR-29c抑制OSCC发生发展并负调控SERPINH1;12、Real Time PCR显示miR-29c在OSCC细胞系中低表达;13、荧光素酶双报告基因检测显示SERPINH1是miR-29c的靶基因,在OSCC中受miR-29c负调控;14、MTT实验表明miR-29c的过表达抑制了OSCC细胞的增殖,SERPINH1过表达可以逆转这种抑制作用;15、划痕实验和Transwell实验表明miR-29c的过表达抑制了OSCC细胞的迁移,SERPINH1过表达可以逆转这种抑制作用;16、DAPI染色结果表明miR-29c的过表达促进了OSCC细胞的凋亡,SERPINH1过表达可以逆转这种促进作用;17、PI单染流式细胞术显示,miR-29c的过表达导致了OSCC细胞生长于S期停滞,抑制了OSCC细胞的增殖,SERPINH1过表达可以逆转这种抑制作用。结论1、SERPINH1在OSCC中显著上调。2、沉默SERPINH1抑制了OSCC细胞的增殖、转移和侵袭,增加了OSCC细胞凋亡。3、miR-29c可以调节SERPINH1的表达。4、miR-29c的过表达可以通过SERPINH1,抑制OSCC细胞的增殖、转移和侵袭,增加了OSCC细胞凋亡。