骨骼肌的质和量是猪肉生产中的重要经济性状。骨骼肌生成具有十分复杂的机理。MyoD是生肌调节因子家族的一员，Myostatin基因是肌肉生长抑制素基因。这两个基因在骨髓肌生成中均起到重要作用，对这两个基因功能的研究将对猪育种及骨骼肌生成机理研究具有重要意义。随着大量哺乳动物基因组图谱的成功绘制，基因功能研究成为热点。RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指由双链RNA介导的mRNA的特异性降解反应，是目前研究基因功能的前沿技术。本研究以体外培养的猪骨骼肌卫星细胞为实验材料，利用RNAi技术，以MyoD与Myostatin为靶基因进行干扰研究，研究干扰前后猪骨骼肌卫星细胞增殖情况的变化和这二个基因的表达规律及其变化；并且以降低其中一个基因的表达为背景，对另一个基因的表达规律进行研究，以明确二者的功能及其相互作用关系。研究结果如下：建立了猪骨骼肌卫星细胞体外培养体系，从形态学，核型分析等方面对猪骨骼肌卫星细胞进行了鉴定。利用RT-PCR方法，分别检测了MyoD，Myostatin基因在体外培养的5个世代的猪骨骼肌卫星细胞的表达情况，5个世代发现MyoD的基因表达量为0.432，0.455，0.352，0.319，0.289；Myostatin的基因表达量为0.414，0.461，0.318，0.319，0.285，均在第二代表达量最高，与第3，4，5世代表达差异显著(P＜0.05)，并且二基因在5个世代表达量趋势一致。在MyoD mRNA上不同区域设计了三对特异性干扰序列，并分别与psiSTRIKE载体进行重组，获得的重组质粒转染体外培养猪骨骼肌卫星细胞，经检测均成功地在猪骨骼肌卫星细胞干扰了MyoD基因。对MyoD与myostatin基因最佳干扰体系进行了筛选与确定。选取0μg／ml、100μg／ml、200μg／ml、300μg／ml、400μg／ml、500μg／ml、600μg／ml、700μg／ml、800μg/ml 9个不同浓度对筛选转染细胞的G418进行筛选，200μg/ml为最佳维持浓度，400μg／ml为最佳高压筛选浓度。对MyoD基因所确定的三对特异性干扰序列的干扰效果进行比较，干扰后基因表达降低量依次为0.098，0.118，0.188，第三对序列显著降低MyoD基因mRNA的表达水平(P＜0.05)；选取干扰时间12、22、32天进行干扰效果检测，MyoD基因mRNA表达量依次为0.188，0.165，0.144，Myostatin基因mRNA表达量依次为0.199，0.097，0.073，二基因均在12天时表达水平显著降低(P＜0.05)。研究了干扰MyoD与Myostatin基因对猪骨骼肌卫星细胞增殖的影响。干扰MyoD组细胞的增殖能力未受到影响(P＞0.05)，在干扰Myostatin组细胞的增殖能力显著提高(P＜0.05)在干扰MyoD、Myostatin基因后对猪骨骼肌卫星细胞Myostatin、MyoD表达规律的变化进行了研究。在干扰MyoD基因使其表达下调后Myostation基因表达显著降低(P＜0.05)；在干扰Myostatin基因使其表达下调后MyoD表达显著升高(P＜0.05)。综合研究成果，得出干扰MyoD、Myostatin基因后猪骨骼肌卫星细胞增殖与二基因表达具有相关性。