近年来,细菌耐药性传播和细菌致病性成为当前社会面临的公共卫生难题之一。铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种环境中普遍存在的条件致病菌,通常以生物膜形式存在,能够分泌多种毒力因子,还可以通过多种方式获得抗生素耐药性,进而给临床治疗和生态环境带来更加严重的威胁。质粒介导的接合转移是细菌耐药性传播重要方式之一。生物膜的形成一方面可保护细菌免受抗菌药物的作用,增强细菌群体的耐药性。另一方面,由于生物膜内细菌丰度较高,给耐药基因的接合转移创造了良好的条件。铜绿假单胞菌的致病性主要归因于毒力因子的分泌,而毒力因子的分泌也与生物膜的形成密切相关。因此,生物膜的调控是控制细菌耐药性和致病性的关键之一。有研究表明,群感效应在控制细菌生物膜形成和毒力因子产生中具有举足轻重的作用。因此,借助群感淬灭效应调控细菌生物膜和毒力因子分泌,有可能成为控制细菌耐药性污染和致病性的有效方式。有研究表明,植物提取物香草醛对可作为一种天然的群感效应抑制剂来调控细菌群感效应系统。本文考察了铜绿假单胞菌群感效应调控对其生物膜的形成及生物膜内细菌耐药基因接合转移的影响机制,探索了香草醛对耐药细菌毒力因子的分泌及相关基因表达的影响。主要研究内容和结论如下:(1)以含有RP4质粒的大肠杆菌E.coli DH5а和铜绿假单胞菌PAOl的接合体系为研究对象,开展群感效应抑制剂对生物膜内细菌耐药性转移的影响探究。测定了香草醛对群感效应系统相关基因的表达、体系内信号分子浓度变化、生物膜形成以及耐药质粒接合转移频率的影响,结果表明,亚抑菌浓度的香草醛在不影响细菌生长的前提下,使Las和Rhl系统的相关基因表达下调,进而抑制了 3-oxo-C12-HSL和C4-HSL的合成。同时,随着香草醛浓度的升高,体系中的两种耐药细菌生物膜形成能力下降,接合转移频率也呈现浓度依赖性的降低。因此认为亚抑菌浓度香草醛可通过影响细菌群感效应系统来调控生物膜的形成进而抑制跨属细菌间的耐药基因水平转移。(2)探究了群感效应抑制剂香草醛对铜绿假单胞菌毒力因子表达的影响。香草醛通过抑制群感效应有效抑制了PAO1绿脓菌素的产生,绿脓菌素的含量随香草醛浓度的增加而逐渐减少。亚抑菌浓度的香草醛有效抑制了PAO1的蹭行运动能力,且通过抑制motA基因的表达抑制了细菌鞭毛介导的泳动能力。