四种水榕试管苗快繁体系的构建及激素调控的研究

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水榕(Anubias barteri var),是一种观赏水草,自然繁殖速率极低。植物组织培养技术可以解决水榕自然繁殖速率极低的问题。在植物的组织培养过程中,生长素与细胞分裂素的含量及比值是影响植物生长的关键因素。目前关于水榕组织培养的研究很少,且对水榕内源激素调控的研究也很少,因此本文研究四种水榕快繁体系构建的相关技术环节,探讨适合四种水榕继代培养最佳的激素配比,研究四种水榕在生长过程中内源IAA和ZT含量的变化;旨在建立起四种水榕适合的快繁体系并探索其激素调控模式,为四种水榕快速繁殖的构建提供理论依据和技术参数。主要研究结果如下:(1)大水榕和小水榕继代培养基为:6-BA3.0mg L-1+NAA0.3mg L-1,增殖倍数分别为4.02和4.33;尖叶榕和燕尾榕继代培养基为:6-BA2.0mg L-1+NAA0.2mg L-1,增殖倍数分别为12.99和6.00;大水榕、小水榕、尖叶榕在培养过程中均能自然生根,燕尾榕生根培养基为:6-BA0.2mg L-1+NAA2.0mg L-1。(2)水榕试管苗出瓶标准:①大水榕试管苗根条数达到5.73条,根长达到3.20cm,株高达到2.94cm及以上;②小水榕试管苗根条数达到3.62条,根长达到1.25cm,株高达到2.32cm及以上;③尖叶榕试管苗根条数达到6.73条,根长达到1.87cm,株高达到2.15cm及以上;④燕尾榕试管苗根条数达到3.45条,根长达到3.32cm,株高达到3.92cm及以上。移栽成活率均达96.6%及以上。(3)HPLC检测水榕内源ZT、IAA采用外标法,峰面积定量。进样量5μl,柱温:25℃;流速:1ml/min。ZT检测波长:270nm,流动相为甲醇:0.075%乙酸=26:74(V/V);IAA检测波长:254nm,流动相为乙腈:0.075%乙酸=30:70(V/V)。(4)在培养初期,添加适宜浓度的外源激素会促进四种水榕内源ZT和IAA含量的增加,并促进小水榕、尖叶榕内源ZT/IAA值的增加。在一定范围内,大水榕、小水榕、燕尾榕增殖倍数随内源ZT含量的增加而增加,并且其培养至60d时增殖倍数的大小取决于其20d时内源ZT的含量高低。(5)大水榕、小水榕、尖叶榕根原基形成时内源IAA含量降至最低,根生长时,内源IAA含量增加。在一定范围内,小水榕和大水榕株高以及大水榕茎粗、叶面积随内源IAA含量的增加而增加。(6)在一定范围内,小水榕的增殖倍数随内源ZT/IAA值的增加而增加,但较低的内源ZT/IAA值有利于株高的增加。燕尾榕生长初期需要较高的内源ZT/IAA,后期则较低。(7)在四种水榕的组织培养过程中,可以通过主要调节外源NAA的浓度来调节大水榕、尖叶榕和燕尾榕的生长,可以通过主要调节外源6-BA的浓度来调节小水榕的生长。
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