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安徽是中国淡水养殖大省,但长期以来水产动物病原学研究比较落后,鱼、鳖、蟹等水产动物的细菌性传染病常有发生,成为制约水产养殖业发展的重要因素.近年来,该实验室先后从省内养殖场发病鱼、鳖、蟹等水产动物体内分离到17株细菌.经过初步的常规鉴定,已确定了其中部分细菌的种属.为全面了解安徽省水产动物病原流行病学基本状况,提供防治水产动物传染病的科学依据以及为深入研究病原菌的致病机理奠定基础,该课题对17株细菌的致病性、形态学、生理生化特性和分子遗传学特性等进行了系统研究.首先,应用动物试验对细菌进行了致病性测定.其次,对17株细菌进行了形态学和生理生化特性表型鉴定.通过涂片、革兰氏染色、光镜下检查,显示所有待鉴定细菌均为革兰氏阴性杆菌.再次,通过测定DNA G+Cmol﹪含量对17株病原菌进行了分子遗传学鉴定.为获得最佳实验条件和可靠的实验数据,以标准株大肠杆菌K<,12>为材料,建立和优化了测定G+Cmol﹪含量的Tm法.由于破碎细菌细胞壁是提取DNA的关键,间接影响DNAG+Cmol﹪含量的测定值.因此,研究中比较了SU法(SDS+超声波)、ES法(溶菌酶+SDS)和ESU法(溶菌酶+SDS+超声波)破碎大肠杆菌K<,12>细胞壁在提取染色体DNA和测定G+Cmol﹪含量中的效果.综上所述,该研究应用API/ATB半自动化细菌鉴定系统和Tm法测定了17株病原菌的生理生化指标和细菌染色体DNA G+Cmol﹪含量,两者结果与《伯杰氏细菌鉴定手册》(第九版)所描述的细菌特性基本相符,从而确立了17株病原菌的种属,它们分布于气单胞菌属(Aeromonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、摩根氏菌属(Morganella)、弧菌属(Vibrio)和变形杆菌属(Proteus)6个菌属,其中BA<,1>、BA<,3>、BA<,11>HX<,6>和J<,23>5株细菌为嗜水气单胞菌(A.hydrophila),BA<,15>、BA<,16>和MA<,1>3株细菌为温和气单胞菌(A.sobria),HX<,2>和HX<,3>2株细菌为鲍氏不动杆菌(A.baumannii),J<,1> 和B<,6>2株细菌为摩氏摩根氏菌(M.morganii),HX<,1>和HX<,5>2株细菌为恶臭假单胞菌(P.putida),J<,6>菌株为荧光假单胞菌(P.fluorescens),HX<,4>、菌株为拟态弧菌(V.minicus),B<,2>菌株为普通变形杆菌(P.vulgaris).