【摘 要】
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为研究克氏原螯虾对饲料中胆固醇适宜需要量,初步揭示胆固醇对克氏原螯虾生长及蜕皮调控机制。设计五组胆固醇添加为0（C0组）、0.25%（C0.25组）、0.50%（C0.50组）、0.75%（C0.75组）、1.00%（C1.00组）的等氮试验饲料（饲料中胆固醇含量实测为0.06%、0.29%、0.54%、0.81%、1.05%）。将225只体型相似的克氏原螯虾（初重4.4±0.1g）随机分为5组,
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为研究克氏原螯虾对饲料中胆固醇适宜需要量,初步揭示胆固醇对克氏原螯虾生长及蜕皮调控机制。设计五组胆固醇添加为0（C0组）、0.25%（C0.25组）、0.50%（C0.50组）、0.75%（C0.75组）、1.00%（C1.00组）的等氮试验饲料（饲料中胆固醇含量实测为0.06%、0.29%、0.54%、0.81%、1.05%）。将225只体型相似的克氏原螯虾（初重4.4±0.1g）随机分为5组,每组3个重复,投放于实验室养殖水槽中,养殖45天后检测。结果如下:克氏原螯虾存活各组间无显著变化（P>0.05）,当胆固醇添加量从0增至0.50%时,增重率、特定生长率平均蜕皮次数显著增加（P<0.05）,随着饲料胆固醇添加量从0.50%增加到1.00%,增重率、特定生长率平均蜕皮次数显著降低（P<0.05）;C0.50组饲料系数最低,含肉率C0.50组最高（P<0.05）;随着饲料胆固醇含量从0增加到1.00%,肥满度、肝体指数显著增加（P0.05）,C0、C0.25组全虾粗脂肪显著低于C0.5、C0.75和C1.0组（P<0.05）。C0.75组谷丙转氨酶（ALT）水平显著高于C0、C0.5和C0.75组,但低于C1.0组（P<0.05）;C0、C0.25、C0.75组谷草转氨酶（AST）水平显著高于C0.5组,但低于C1.0组（P0.05）;C0.5组球蛋白水平显著高于C0组（P0.05）。根据形体指标、生长性能、体成分及血液生化指标综合分析,克氏原螯虾对饲料中胆固醇的适宜需要量为0.53%-0.54%。随着饲料中胆固醇水平从0增加到0.54%,几丁质酶m RNA表达和血液LDL-C含量随胆固醇水平显著升高（P<0.01）,从0.54%增加到1.05%时显著降低（P<0.05）;C0.25组MIH（molt-inhibiting horm one,MIH）表达水平显著高于C0、C0.50和C0.75组（P<0.05）;随着胆固醇添水平增的上升,血清、肝胰腺和肠中总胆固醇含量以及血清中HDL-C含量显著增加（P<0.05）。随胆固醇水平从0增加到0.54%,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性显著升高（P<0.05）,从0.54%增加到1.03%时显著降低（P<0.05）,而丙二醛（MDA）含量则呈相反趋势。C0、C0.5、C0.75组谷胱甘肽（GSH）活性均显著高于C0、C1.0组,但低于C0.25组。固醇调节元件结合蛋白-1（sterol regulatory element-binding protein-1,srebp-1）是调控脂质代谢的重要因子,主要负责调控生物体内脂肪酸、甘油三酯和胆固醇的合成。本试验提取了克氏原螯虾（Procambius clarkii）肝胰腺组织中的RNA,利用RACE技术进行扩增、拼接了srebp-1基因的ORF全长序列。得到的序列长度为3610bp,其中非编码区369bp,编码区3241bp,共编码1079个氨基酸。序列比对结果显示,克氏原螯虾与拟穴青蟹（Scylla paramamosain）、南美白对虾（Penaeus vannamei）的同源性较高。通过构建系统进化树发现,克氏原螯虾与拟穴青蟹关系最为接近,进化中较为保守,与其他鱼类同源性较低。结论:克氏原螯虾饲料中胆固醇适宜含量为0.53%-0.54%;饲料中适宜的提高克氏原螯虾的抗氧化能力,过量的胆固醇对蜕皮没有促进作用,并且会降低抗氧化能力;克隆克氏原螯虾srebp-1基因全长为3610bp,共编码1079个氨基酸,并且进化过程中保守性较高。
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