【摘 要】
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自1992年引进我国以来,大菱鲆已发展成为我国北方沿海的一种重要经济养殖鱼类。但由于在苗种引进时受欧洲等苗种供应商的限制,及我国苗种生产过程中缺乏适当的育种规划,近交
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自1992年引进我国以来,大菱鲆已发展成为我国北方沿海的一种重要经济养殖鱼类。但由于在苗种引进时受欧洲等苗种供应商的限制,及我国苗种生产过程中缺乏适当的育种规划,近交衰退的情况比较严重。因此,急需开展大菱鲆优良种质的培育工作。本研究对两个大菱鲆养殖群体——西班牙群体(S)和英国群体(E)的杂交子一代的杂种优势进行了研究,并利用AFLP技术从DNA水平上分析了杂种优势产生的原因。主要结果如下:1、对两个大菱鲆养殖群体的杂交效果进行了分析。采用完全双列杂交法对两个大菱鲆养殖群体——西班牙群体(S)和英国群体(E)进行群体间杂交及群体内自繁,得到了S♂×S♀、E♂×E♀、S♂×E♀和E♂×S♀4个组合的子一代。并对各交配组合的受精率、孵化率、畸形率、30日龄和70日龄稚鱼的体长、质量等指标进行了比较。结果表明:杂交组与自繁组在受精率、孵化率及畸形率等方面不存在显著性差异;但杂交组在30日龄和70日龄稚鱼的体长、质量方面,与自繁组相比表现出不同程度的杂种优势。S♂×E♀组30日龄体长的杂种优势达到5.43%,E♂×S♀组70日龄质量的杂种优势达到25.00%。实验初步显示,不同养殖群体间的杂交可有效地改良大菱鲆的生长性状。2、对AFLP反应条件进行摸索,分析了DNA提取、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应、银染等步骤进行了分析。结果表明,用EcoRI/MseI双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1:6 (w:w)的EcoRI端与MseI端选择性扩增引物比和20μl选择性扩增体积,可得到十分稳定的结果。所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰、背景干扰小的图像。扩增片段长度多态性(AFLP)技术是分析大菱鲆群体遗传变异的有效技术之一。
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