目的：以不同浓度的银杏黄酮(GBE)干预顺铂(cisplatin，CDDP)所作用的卵巢颗粒细胞。四甲基偶氮唑蓝法( MTT)检测不同浓度的GBE对CDDP所作用的卵巢颗粒细胞的生长影响。化学发光法测定各组细胞上清液中的雌激素水平，分别测定不同浓度的GBE对CDDP所作用的卵巢颗粒细胞中超氧化物歧化酶( SOD)活力、丙二醛(MDA)含量，从而探讨GBE对CDDP所致卵巢功能损伤的保护作用。　　 方法：　　 1.研究对象　　 1.1 实验组：收集2010年4月-2010年10月在我院行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的卵泡液，提取卵巢颗粒细胞，分为CDDP组(颗粒细胞中只加入CDDP)和CDDP+GBE组(在加入CDDP的同时分别加入4种不同浓度的GBE)。　　 1.2 对照组：只含有卵巢颗粒细胞不添加任何处理因素的阳性对照组。　　 所选患者共82例，（30.62±2.13岁），被纳入的条件为月经规律，基础体温双相，生殖激素水平在正常范围内且无多囊卵巢综合征及子宫内膜异位症，近6个月无服用激素类药物及免疫抑制类药物。　　 排除：子宫肌瘤、乳腺癌、子宫内膜癌等其它妇科肿瘤；内分泌、免疫及代谢性疾病；高血压、心脏病、肾病等内科疾病等。按促性腺释放激素激动剂/促卵泡激素/人绒毛膜促性腺激素长周期方案诱发排卵。　　 2.标本采集　　 收集阴道B超引导下后穹窿穿刺抽吸双侧卵巢的卵泡液于试管中，即刻送实验室进行培养。　　 3.实验方法　　 3.1 细胞培养卵泡液经离心、漂洗、分离、消化。接种于6孔培养板中，加入含10％胎牛血清的DMEM培养基，37℃、5％CO2培养箱中培养24h，弃去未贴壁细胞及红细胞，继续培养，倒置显微镜下观察细胞形态变化及生长状况。　　 24h镜下观察，细胞长满90％板壁时，吸去培养基，Hands液冲洗，弃去未贴壁细胞和红细胞。0.25％胰蛋白酶室温下消化，镜下观察细胞收缩变圆时，加入Hands液终止消化，继续培养。　　 3.2 CDDP对颗粒细胞生长影响的MTT实验分别取CDDP浓度0、2.5、5、7.5、10ug/ml作用于卵巢颗粒细胞，48h后酶联免疫检测仪测定细胞吸光度值（OD值），计算细胞抑制率，取细胞抑制率达30％以上的CDDP浓度10ug/ml，为以下实验做准备。3.3 CDDP与不同浓度的GBE合用对颗粒细胞生长影响的MTT实验CDDP与不同浓度的GBE分别同时加入，每一浓度设3个复孔，并设空白组，培养48h测定OD值。3.4收集细胞培养48h后的细胞上清液，并收集吸去上清液后的颗粒细胞，化学发光法测定各组细胞上清液中的雌激素水平。3.5将上述收集的颗粒细胞按照SOD、MDA试剂盒要求取上清液测定各管OD值，BCA法测定各组细胞中蛋白的含量，计算细胞中SOD活力、MDA含量。　　 结果：　　 1.细胞生长情况颗粒细胞经台盼蓝染色测定细胞活性90％以上。倒置显微镜下观察，接种细胞呈圆形，6h后即开始贴壁，24h后基本贴壁完全并开始生长。　　 2.药物对颗粒细胞的生长影响　　 2.1 CDDP对颗粒细胞生长的影响CDDP对颗粒细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性即CDDP浓度越大OD值越小。随着药物浓度的增加，对细胞的抑制作用逐渐增强，。　　 2.2 CDDP与不同浓度的GBE合用对颗粒细胞的生长影响CDDP与GBE175、225、275、325ug/ml分别同时加入比较CDDP+GBE175ug/ml组比CDDP+GBE225ug/ml组显著抑制细胞生长，CDDP+GBE225ug/ml组比CDDP+GBE275ug/ml组显著抑制细胞生长，CDDP+GBE275ug/ml组CDDP+GBE325ug/ml组相比，无统计学意义。　　 随着GBE浓度的增加，对细胞的抑制作用逐渐减弱。但达到一定浓度以后，变化趋势不再增加。　　 2.3 CDDP组与CDDP加入不同浓度的GBE合用组对颗粒细胞生长影响的比较CDDP组与CDDP+GBE175ug/ml比较CDDP组比CDDP+GBE175ug/ml组显著抑制细胞生长。　　 CDDP组与CDDP+GBE225ug/ml比较CDDP组比CDDP+GBE225ug/ml组显著抑制细胞生长。　　 CDDP组与CDDP+GBE275ug/ml比较CDDP组比CDDP+GBE275ug/ml组显著抑制细胞生长。　　 CDDP组与CDDP+GBE325ug/ml比较CDDP组比CDDP+GBE325ug/ml组显著抑制细胞生长。　　 与空白对照组相比，CDDP组和CDDP+GBE组与空白对照组均有统计学意义。　　 3.雌激素水平的测定比较CDDP组与CDDP加入不同浓度GBE组细胞上清液中雌激素水平比较CDDP组的雌激素水平低于CDDP+GBE组，但与CDDP+GBE175ug/ml组比较无统计学意义。　　 CDDP组与CDDP+GBE225、275、325ug/ml组的雌激素水平比较有统计学意义。　　 CDDP+GBE225、275、325ug/ml组各组间比较无统计学意义。　　 与空白对照组相比，CDDP组和CDDP+GBE组与空白对照组均有统计学意义。　　 4.CDDP组与CDDP加入不同浓度GBE组细胞中抗氧化水平的比较　　 4.1 CDDP组与CDDP+GBE175、225、275、325ug/ml组细胞中SOD活力的比较CDDP组与CDDP+GBE175、225、275、325ug/ml组分别比较均有统计学意义。CDDP+GBE175ug/ml组与CDDP+GBE225、275、325ug/ml组之间比较有统计学意义。CDDP+GBE225、275、325ug/ml各组间比较无统计学意义。　　 与空白对照组相比，CDDP组和CDDP+GBE组与空白对照组SOD活力比较均有统计学意义。　　 4.2 CDDP组与CDDP+GBE175、225、275、325ug/ml组细胞中MDA含量的比较CDDP组与CDDP+GBE175、225、275、325ug/ml组MDA含量比较均有统计学意义。　　 CDDP+GBE275ug/ml与CDDP+GBE325ug/ml比较无统计学意义。　　 与空白对照组相比，CDDP组和CDDP+GBE组与空白对照组MDA含量比较均有统计学意义。　　 结论：　　 1.CDDP能显著抑制体外培养的卵巢颗粒细胞的增值，呈剂量依赖性。　　 2.CDDP+GBE组对体外培养的卵巢颗粒细胞的抑制作用低于单用CDDP组，且随着GBE浓度增加其抑制作用逐渐减弱。但达到一定浓度后，变化趋势不再增加。　　 3.CDDP+GBE组的雌激素水平高于CDDP组，但加入GBE小剂量组与CDDP组差异无显著性。随GBE加入浓度增加雌激素水平逐渐增加，但达到一定浓度后差异无显著性。　　 4.CDDP+GBE组对颗粒细胞的抗氧化水平高于CDDP组，当GBE加入浓度达到一定程度以后，各组间的变异不再明显。　　 CDDP对卵巢颗粒细胞的抑制作用可能是通过细胞的氧化损伤实现的，GBE对颗粒细胞的抗氧化作用可能对顺铂所致的卵巢颗粒细胞的抑制作用起到一定的拮抗，从而应用适当浓度的GBE对于顺铂对卵巢的损伤起到保护作用，为化疗所致卵巢功能损伤的保护作用提供新的理论基础。