甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1全长cDNA的克隆、突变体构建及转化

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乙烯作为一种重要的植物激素,对植物的生长发育起着调节作用。尤其对于呼吸跃变型果实来说,乙烯对果实的成熟起促进作用。经过十几年对模式生物拟南芥的分子遗传学研究,已经基本建立了植物乙烯信号转导的线性模型。而乙烯受体ETRI是乙烯生物合成和信号转导途径中的一个关键因子,决定着植物对乙烯的敏感能力,控制着植物的衰老进程。在拟南芥和番茄中,ETRl发生功能获得性突变后能够导致乙烯不敏感。本论文应用RT-PCR的方法从甜瓜品种河套蜜瓜的中果肉组织中克隆到乙烯受体基因Cm-ETR1全长cDNA序列。根据拟南芥和番茄乙烯受体功能获得性突变体的氨基酸序列,设计合成五对引物,通过重叠延伸PCR扩增得到甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1的五个突变体基因,分别命名为Cm-ETR1A31V、Cm-ETR1P36L、Cm-ETR1C65Y、Cm-ETR1H69A、Cm-ETR1A102T。构建五个突变体植物表达载体,应用花粉管通道法导入河套蜜瓜,获得转基因河套蜜瓜。
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