目的:明确在前列腺癌细胞中转录因子MAX是否参与AR介导的基因转录抑制过程,初步探究MAX参与AR负调控作用机制以及MAX在前列腺癌由ADPC转变为CRPC的过程中发挥的作用。方法通过生物信息学分析AR负调控基因的启动子区域的特点与共性,并结合RNA干扰技术与q PCR筛选并验证MAX参与了AR对下游基因负调控过程;通过CO-IP、细胞免疫荧光、DUO-LINK等方法验证MAX是否与AR结合;随后通过转录组测序技术分析敲低MAX之后的LNCa P细胞在DHT刺激下的基因表达变化情况,分析受AR与MAX双重调控的下游基因特征,并通过Ch IP等实验进行进一步明确其调控作用;结合前人研究成果和生物信息学分析,通过药物阻断与调控前列腺癌细胞中MAX的表达,借助q PCR、Western blot等实验技术明确MAX与AR共同调控下游基因的具体机制。最后通过MTT、Invasion Assay等实验方法确定MAX的对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响,并通过建立人前列腺癌异种原位种植瘤裸鼠模型进一步验证MAX对前列腺癌细胞生长的调控作用。结果1.AR并非通过结合特异的抑制性雄激素相应位点抑制下游基因的表达,而是通过与MAX等其他转录因子结合抑制下游基因的转录;2.MAX参与AR对下游基因转录过程的抑制调控,干扰LNCa P细胞MAX的表达可以阻碍AR对下游负性调控基因的转录抑制作用;部分基因的表达受到MAX与AR的联合抑制作用;3.MAX可以与AR相互结合产生转录抑制作用,一同调控下游NCOR2、MDK等下游基因的表达。4.进一步的研究发现,AR与MAX结合可以促进H3K56位点去乙酰化,进而抑制下游基因转录过程,而去乙酰化酶抑制剂S4P可以逆转这一过程。5.MAX可以抑制前列腺癌细胞的增殖与侵袭,随着前列腺癌的发展,组织中MAX的表达逐渐降低。在LNCa P-AI细胞中过表达MAX,可以抑制细胞的增殖和侵袭。结论AR可以通过与辅因子MAX相互作用共同负调控下游基因。在缺少DHT的情况下,下游基因由于缺少AR与MAX的转录负调控作用,基因的表达量会增加,进而促进前列腺癌细胞增殖和转移。提示我们,AR负调控作用在前列腺癌由ADPC发展为CRPC过程发挥了重要作用,深入研究AR的负调控作用可以为前列腺癌临床治疗提供新的基础医学线索与依据。