微生物转化槐角和虎杖中生物活性物质的研究

来源 :南京师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:glittering789
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中药的生物转化是当前中药现代化的研究热点,本工作对槐角和虎杖两种中草药的生物转化进行了研究。槐角富含黄酮和异黄酮类物质,染料木素为异黄酮类物质中活性功能最高的一种,具有弱雌激素样作用,被广泛应用于医药和保健品等领域。5,7,8,4’-四羟基异黄酮是染料木素的衍生物,具有很强的酪氨酸酶抑制活性,在食品、医疗、美容等领域有着广泛的应用前景。虎杖的主要药用成分之一是白藜芦醇,但含量较低(0.45%),而虎杖中的虎杖苷(白藜芦醇苷)含量可达2.55%,将白藜芦醇苷转化为白藜芦醇可使其含量提高3.3倍。本工作共筛选得到两株功能菌,一株可高效地将染料木苷转化为染料木素,另外一株可代谢转化染料木素为新产物,结合菌落的形态特征与ITS序列分析,代谢染料木素的菌鉴定为棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus),保藏号CCTCC NO: M2011264,将其接种到槐角的提取液中,其中染料木苷和槐角苷先被转化成染料木素,然后染料木素被进一步转化为新产物。使用制备液相AQ-C18(22mm×250mm,5μm)色谱柱,经线性洗脱和进一步分离,可得到含量为98%的产物,通过质谱、红外、核磁共振等分析,鉴定结构为5,7,8,4’-四羟基异黄酮。经单因素及正交试验,得到白藜芦醇苷和白藜芦醇的提取条件为:提取溶剂为80%乙醇,料液比1:20,60℃,超声40min的条件下,提取率分别为2.32%和0.412%.通过筛选得到特异转化白藜芦醇苷的转化菌,通过形态学观察初步确定该菌属于青霉属。将转化菌接种至虎杖提取液中,转化至32h,白藜芦醇的含量增加至最高值,转化率为100%.对转化菌所产酶的酶学性质进行研究,最适pH为5.0,在pH4.0-6.0之间保持较高的酶稳定性,最适温度为60℃, Fe2+、Na+和Ca2+对酶活力有激活作用;虎杖苷是该酶的适宜水解作用底物。用酶液直接作用于虎杖粉末,在12h后可以将虎杖苷完全转化,转化率为100%.
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