生物材料中甲壳素或壳聚糖由于是大分子,不溶于水以及与蛋白质等组分结合在一起而难以被定量测定,有文献报道采用甲壳素/壳聚糖水解成氨基葡萄糖,再用比色法测定,但测定结果误差较大.目前,工业生产中尚无甲壳素/壳聚糖纯度的标准测定方法.因此,该文研究了三种甲壳素和壳聚糖纯度测定方法及其影响因素,提出了一种新的可准确测定其纯度的色谱分析方法.首先,详细探讨了甲壳素水解生成氨基葡萄糖的优化条件及酸水解条件下氨基葡萄糖盐酸盐的稳定性,其中酸浓度、水解温度和水解时间是甲壳素水解定量生成氨基葡萄糖的关键,通过正交实验,确定了最佳水解条件.其次,研究了比色法测定甲壳素水解产物氨基葡萄糖盐酸盐的方法,探讨了比色法测定氨基葡萄糖的影响因素,如乙酰化温度、pH值、对二甲氨基苯甲醛和碳酸钠的浓度和放置时间对实验结果的影响.第三,为了更准确地测定GAH含量,进而测定甲壳素的纯度,应用气相色谱法(GC)和液相色谱法(HPLC),重点探讨了色谱法分析GAH的影响因素如衍生化反应的温度和时间、pH值,并就其它中性糖、氨基酸对测定结果的干扰进行了分析.第四,将色谱法的实验结果与现有的比色法进行了比较和对照.综上所述,色谱法可准确测定甲壳素/壳聚糖样品的纯度,对比色法校正后,同样可用于甲壳素纯度的测定.纯度测定的研究表明壳聚糖品质的好坏与脱乙酰度的高低无关,而应该用纯度作为一项主要质量指标.