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本文对两种来源于印度和泰国的木果楝属(Xylocarpus)红树植物X.moluccensis和X.granatum种子的柠檬苦素成分及其生物活性进行了研究。X.moluccensis的种子分别采集于印度哥达瓦里河口、克里希纳河口和泰国董里府的红树林湿地,而X.granatum的种子则采集于印度克里希纳河口的红树林湿地。本研究主要内容包括:
⑴通过乙醇提取、乙酸乙酯萃取、常压正反相硅胶柱层析和高效液相色谱等多种分离纯化方法得到53个单体化合物。利用质谱、核磁共振波谱、单晶X-射线衍射、紫外、旋光和圆二色散光谱等手段确定了上述单体化合物的结构,包括新柠檬苦素31个,已知柠檬苦素21个和已知原柠檬苦素1个。与此同时,采用核磁共振波谱、单晶X-射线衍射、旋光光谱和圆二色散光谱的量子化学计算技术确立了8个新碳骨架柠檬苦素的绝对构型。
⑵31个新柠檬苦素中,godavarins A-D(J1-J4)为首次发现的含有C7-C28酯连接的δ-内酯环结构的mexicanolides; andhraxylocarpins A-B(J14和J22)为C1-C2断裂后分子内再重排而形成的具有9-氧-三环[3.3.2.17,10]十一烷-2-烯新颖碳骨架的柠檬苦素;andhraxylocarpins C-D(J15和J23)为C1-C2断裂后分子内再重排而形成具有(Z)-二环[5.2.1]葵烷-3-烯-8-酮新颖碳骨架的柠檬苦素;andhraxylocarpin E(J24)为C28-C30碳碳相连而成的具有三环[3.3.1.13,6]葵烷-9-酮新颖骨架的柠檬苦素;thaixylomolinA(J25)为第1个1,6-氧桥相连的secomahoganin型柠檬苦素;而thaixylomolins B-C(J26-J27)则是含有1个罕见的五元取代吡啶单元的phragmalin型柠檬苦素。
⑶22个已知物中,2-hydroxyfissinolide(193),6R-hydroxymexicanolide(194),swietmanins G-H(195-196),17β-hydroxyazadiradione(197), deacetylsecomahoganin(198)和6-epidestigloylswietenine diacetate(199)为首次从木果楝属红树植物中分离鉴定。6-deacetoxy-7-deacetyl-chisocheton compound E(192)和2-hydroxyfissinolide(193)的NMR波谱数据首次被正确地完整归属,且193的绝对构型为铜靶单晶X-射线衍射首次确立。
⑷对椰心叶甲3龄幼虫的拒食和杀虫活性测试表明:moluccensin R(J16),3β-acetoxy-6-deoxy-swietenine(10),fissinolide(16),2-hydroxyfissinolide(193)和6R-hydroxymexicanolide(194)具有一定的拒食活性。其中,化合物10在0.5 mg/mL的浓度下给药时间为24和48小时的拒食率均超过70%,且显示出一定的毒杀活性。化合物193给药时间为24小时的半数拒食浓度(AFC50)为94μg/mL。
⑸抗炎活性测试表明:thaixylomolin B(J26)能够抑制小鼠巨噬细胞系RAW264.7在大肠杆菌脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)双诱导下的一氧化氮产生,其IC50值为84.3μM。本研究结果与课题组此前对该属植物来源柠檬苦素的研究累积提示:环境因子是造就木果楝属红树植物拥有丰富的柠檬苦素化合物结构多样性的主要原因,而遗传背景的影响不显著。