【摘 要】
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近年来有研究发现蓝藻分泌的一些化合物具有内分泌干扰物活性,可影响水生动物的生长发育。我们前期通过LC/MS代谢组学发现蓝藻水华的常见种铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)胞外分泌物中具有多种脂类化合物,但这些脂类是否参与蓝藻的化感效应,以及它们是否影响水生动物的脂肪代谢,目前均不清楚。在水生态系统中,浮游动物架起了联系初级生产者和次级生产者的桥梁,可以作为反应水环境健康的指示
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近年来有研究发现蓝藻分泌的一些化合物具有内分泌干扰物活性,可影响水生动物的生长发育。我们前期通过LC/MS代谢组学发现蓝藻水华的常见种铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)胞外分泌物中具有多种脂类化合物,但这些脂类是否参与蓝藻的化感效应,以及它们是否影响水生动物的脂肪代谢,目前均不清楚。在水生态系统中,浮游动物架起了联系初级生产者和次级生产者的桥梁,可以作为反应水环境健康的指示物种。因此本研究选取浮游动物模式物种大型溞(Daphnia magna),观察了铜绿微囊藻胞外分泌物(M.aeruginosa exudates,MaE)暴露对其繁殖和脂肪代谢的影响,并结合脂质组学探究其脂肪代谢受干扰后影响繁殖效率的机制。本研究的主要结果如下:(1)在21天的慢性暴露实验中,与对照组相比,高浓度的MaE使大型溞的怀卵和产幼时间显著提前;同时MaE暴露处理后大型溞的首次怀卵数以及总产幼溞数都增加,且高浓度的MaE效果最为显著;MaE处理后大型溞体长也显著增加,且在第7天的时候呈现非常明显的浓度效应。(2)MaE在急性暴露下激活了大型溞蜕皮激素和保幼激素信号通路:两种浓度的MaE均使得大型溞胆固醇含量增加;且蜕皮甾体2-羟化酶(E2H)、蜕皮激素、蜕皮激素20-单加氧酶(CYP314A1)、20-羟基蜕皮激素(20E)、蜕皮激素受体(ECR)以及维甲酸X受体(RXR)活性和含量都增加;同时,法呢酸甲基转移酶(FAMe T)、保幼激素和类固醇辅助激活因子(SRC)活性和含量也显著增加。此外MaE也促进了三酰基甘油的合成:固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、二酰基甘油转移酶(DGAT)以及三酰基甘油(TAG)含量和活性也增加。另外尼罗红染色也显示MaE增加了大型溞体内的脂滴积聚。(3)大型溞蜕皮激素信号通路中的ECR、HR3、Neverland基因在MaE暴露48h后上调表达,RXR基因在48h和96h也上调表达。保幼激素通路中SRC和Met基因在MaE暴露48h后上调表达,Hb2基因在MaE暴露48h后上调表达,而在96h后则受高浓度MaE下调表达。参与三酰基甘油合成的SREBP-1和DGAT-1基因在MaE暴露48h后上调表达,而在暴露96h后受高浓度MaE上调表达。(4)大型溞脂质组学分析显示:高浓度MaE诱导的差异脂质化合物最多,48h暴露后为748个上调、752个下调,96h暴露后为642个上调和592个下调;主成分(PCA)分析发现高浓度MaE处理组脂质代谢物与对照组相比分散度大于低浓度MaE组,说明高浓度MaE比低浓度MaE对大型溞脂质代谢物的影响更大。所有受MaE影响的脂质化合物中甘油酯类、甘油磷脂类和鞘脂类受到的影响最显著。KEGG显著富集通路分析发现,MaE影响了大型溞钙离子信号、内源性大麻素信号、抗胰岛素代谢途径与神经信号传递等相关代谢途径,表明MaE可能通过影响大型溞内分泌稳态进一步影响其脂肪代谢,并可能产生其它代谢危害效应。综上,高浓度和低浓度的蓝藻胞外分泌物都对大型溞的脂肪稳态造成了干扰,从而增强了其繁殖效率。且高浓度蓝藻胞外分泌物效应更强,其对内分泌信号通路和神经信号稳定的影响更增强了对大型溞脂肪代谢和繁殖效率的干扰。本研究提示了水华蓝藻干扰浮游动物繁殖的生态危害以及参与该过程的脂肪代谢机制,有助于预警和防控蓝藻水华的生态风险。
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