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人促甲状腺激素受体(hTSHR)存在于甲状腺滤泡细胞膜上，属于鸟苷酸调节(G)耦联蛋白受体，为大分子糖蛋白。其膜外区与促甲状腺激素(TSH)结合，来调节甲状腺细胞的功能和生长，也是Graves病等自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease，AITD)产生TSHR自身抗体(TSHRAb)的主要靶抗原。TSHR基因突变是高功能甲状腺腺瘤或结节发病的主要原因，并可引起非自身免疫性甲状腺功能亢进和甲状腺功能减低。TSHR膜外区的基因突变被怀疑参与了AITD的发病。本实验使用TRIzol试剂一步法，从手术切除的甲状腺组织中提取总RNA，使用自行设计、合成的引物，运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出完整的hTSHR膜外区基因。通过四色荧光标记的Sanger双脱氧核苷三磷酸链末端终止法，在Beckman Coulter 2000型全自动DNA序列分析仪上，对4例正常对照，12例Graves病患者，4例桥本氏甲状腺炎患者和11例结节性甲状腺肿患者的甲状腺组织的hTSHR膜外区基因进行了序列分析。结果表明：PCR扩增及DNA测序引物设计合理、合成成功；RT-PCR方案正确，成功得到长为1300bp的hTSHR膜外区cDNA PCR产物；DNA测序方法正确，顺利获得hTSHR膜外区完整的基因序列。在4例正常对照，27例甲状腺疾病患者中，hTSHR膜外区基因序列与Nagayama 卫生部科学研究基金资助项目 天津医科大学博士学位论文 或Misrahi等报告的hTSHR序列完全一致，均未发现有基因突变 或多形性现象。但在第 66 位核苦酸上发现有碱基替代现象，在 所有 31例甲状腺组织中，20例碱基为胸腺啼陡“丁”，11例碱基 为胞啼陡“C”。但它们组成的密码子由于遗传密码的简并性，它 们所编码的氨基酸是相同的，都是天冬酚胺归sparaglne，Asp＼ 故并不会造成hTSHR氨基酸组成的改变。本实验说明，hTSHR 膜外区基因突变可能不是上述甲状腺疾病的主要致病因素，关于 它们的分子发病机制尚需进一步深入的研究。