目的通过免疫组化和Western blot等方法,观察由乙肝病毒X蛋白(HBX)引起的HepG2细胞内Wnt诱导的分泌型蛋白1(以下简称为WISP-1)的变化,探索乙肝病毒导致肝癌的新的机制。方法(1)分别收集肝癌,癌旁,及正常肝组织标本。采用免疫组化的方法检测WISP-1在这些组织内的表达及差异。(2)采用脂质体Lipofectamine2000为媒介,分别将pc-DNA3.1(+)和pc-DNA3.1(+)-HBX两种质粒转染HepG2细胞,经过G418长期筛选,得到稳定转染的细胞株G0和Gx。(3)采用PCR技术检测G0和Gx中WISP-1mRNA的表达水平及差异。(4)采用Western blot从蛋白水平检测G0和Gx中WISP-1的表达水平及差异。结果(1)免疫组化结果显示,肝癌组织中WISP-1的阳性表达率高于癌旁组织及正常肝组织,结果经X2检验差异有统计学意义。提示WISP-1在肝癌组织中高表达。(2)经过G418稳定筛选一月后,成功建立能够稳定分泌HBX蛋白的Gx细胞系及相应的空转细胞系G0。(3)Western blot鉴定Gx和G0转染成功。且Gx细胞能够表达HBX蛋白。(4)PCR结果显示WISP-1 mRNA在Gx中的表达量高于G0。(5)Western blot结果显示WISP-1蛋白在Gx中的表达量高于G0。结论WISP-1在肝癌组织中高表达。乙肝病毒感染肝细胞后,其X蛋白可通过上调WISP-1的表达水平,进而引起肝癌的发生。