大豆疫霉菌毒力及遗传多样性分析

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由Phytophthora sojae引起的大豆疫霉根腐病是大豆上的一种毁灭性病害,自上世纪90年代初在我国东北地区发现该病害以来,其危害面积逐年增加,危害日益严重。近年的调查表明,大豆疫霉根腐病在我国9省(自治区)均有发生,其中在东北和黄淮大豆产区较为严重。本研究主要包括以下四个方面:1.采用改进的叶碟诱钓法对我国黑龙江省、河南省、安徽省、湖北省及新疆维吾尔自治区共计25个市(县或国营农场)的79份大豆田土壤样品进行病原菌的分离,其中18份土壤分离到大豆疫霉,分别为来自黑龙江省的6份、、河南省的2份、安徽省的3份、新疆自治区7份土壤样品;未从来自湖北省的土壤样品中分离到大豆疫霉菌。2.对81个大豆疫霉菌菌株进行毒力鉴定,结果表明我国大豆疫霉菌的毒力结构十分复杂。来源于不同地区、同一地区的不同地块以及同一地块的菌株之间都存在明显的毒力差异。81个分离物共产生56个毒力型。将鉴定得到的毒力型与国外已经报道的生理小种反应型比较,没有发现相同的,均为新发现的反应型。毒力聚类分析表明黑龙江的菌株毒力变异较大,分散在4个组中。安徽菌株毒力变异范围较小,10个菌株分布于相似系数为0.832的同一亚组中。3.利用本实验分离的81个菌株和实验室保存的22个菌株共103株大豆疫霉菌进行基因组DNA的AFLP分析。采用选择性扩增引物的选择性碱基数目为“2+2”,首先用6个地区来源不同,毒力类型相差较大的菌株对80引物进行筛选,再选用扩增效果好、多态性高的25个引物对103菌株进行分析。利用数据分析软件NTSYS-PC 2.1进行数据处理与聚类分析。结果表明供试菌株可划分7组。AFLP分组与菌株的地理分布之间有一定的相关性。安徽、新疆、河南的菌株地区内遗传距离较小,其它地区遗传距离较大。4.采用下胚轴伤口接种法,选取7株毒力型不同的新疆地区菌株对19个新疆主栽大豆品种(品系)进行抗病性鉴定。结果表明在新疆,大豆疫霉菌对已知抗病基因Rps1a、Rps1d、Rps2、Rps3c、Rps4、Rps5、Rps6、Rps7的毒力超过50%,说明这些基因在新疆已经失去利用价值,而对Rps1c和Rps1k具有毒力的菌株很少,含有这两个基因大豆品种可以用于病害防治和作为抗源利用。
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