湖南香柚中黄酮类化合物的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuyaya
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本论文以湖南香柚落果为原料,探讨了其主要生物活性成分——黄酮类化合物的超声波提取工艺和分离纯化方法,并对香柚中的黄酮类物质进行了定性和定量研究。本文旨在为柚果类副产物的综合利用提供理论依据和技术支撑。其主要研究结果如下:1.采用双波长分光光度法建立了湖南香柚落果中黄酮类化合物含量的测定方法,检测方法呈现良好的线性关系,回归方程为:y=0.0071x+0.0081,线性相关系数R2=0.9995。2.通过比较四种不同的提取剂对香柚落果中黄酮类化合物提取量的影响,选择乙醇作为湖南香柚中黄酮类物质的提取溶剂,提取出的总黄酮含量为0.99%。3.对影响黄酮类化合物提取量的各个因素进行了单因素试验,采用正交试验设计,确定了香柚落果中黄酮类化合物浸提的最佳工艺条件,试验结果表明,最佳提取方案为乙醇浓度为80%、原料粉与提取液比为1:10、提取时间为60min、提取温度为70℃。最优试验组合中香柚落果中黄酮类化合物的提取率为4.52%。各个因素对香柚落果中黄酮类化合物得率的影响顺次为:A>D>C>B,即提取温度影响最大,其次是原料粉与提取液比和提取溶剂浓度,提取时间对黄酮类化合物的提取影响不大。4.在一定条件下,比较AB-8、NKA-9、D110、ADS-17四种大孔树脂对湖南香柚中黄酮类化合物的吸附率和解析率,试验结果表明,AB-8大孔树脂对湖南香柚中黄酮类物质具有良好的吸附作用,总黄酮吸附率达到0.70mg/mL,总黄酮回收率达到82.3%,用于纯化黄酮类物质是可行的。5.通过大孔树脂的动态吸附和动态洗脱试验得出,分离纯化湖南香柚中黄酮的最佳条件为:AB-8大孔树脂径高比1:10;吸附流速为1.5BV/h;淋洗液pH值为4.0;使用4BV用量70%的乙醇溶液作为洗脱剂;解析流速为2BV/h;大孔树脂重复使用3次之后需要再生。6.本试验采用液质联用仪对纯化后样品中黄酮类物质进行了定性检测,在30min内共分离出6个峰,经初步鉴定,其中四种物质为黄酮类物质,包括柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷。经加标回收率及精密度试验,该方法稳定可靠。7.本试验进行了纯化后样品中黄酮类化合物的定量分析,选取柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素以及桔皮素共五种黄酮类物质作为标准样品,通过对测定香柚黄酮色谱条件的试验,确定了检测波长,在l0min内分离出了柚皮苷和新橙皮苷,其中柚皮苷的保留时间为3.34min,含量为34.87mg/g,新橙皮苷保留时间为3.58min,含量为9.39mg/g。经加标回收率及精密度试验,该方法稳定可靠。
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