植物常常受到生物或/和非生物胁迫，严重影响了植物的生长与发育，甚至导致植物无法完成它们的生命周期。烟草是一种经济作物，也是一种重要的模式植物。烟草花叶病毒(TMV)是烟草的主要病害之一。烟草与TMV的相互作用是研究植物抗病机理的重要模式之一。对烟草受TMV和其它胁迫诱导的相关基因的表达和功能进行研究，为理解植物抗生物和非生物胁迫机理有重要意义。 本论文主要从两方面进行烟草抗胁迫相关基因的研究。其一，我们用RNA沉默技术研究了一个抗病基因的功能。其二，结合生物信息学和分子生物学技术克隆胁迫相关基因，并且，对它们的表达特性做出进一步分析。具体内容如下： 1、利用PCR的方法扩增出CN基因片段和GUS基因，通过不同的酶双酶切后连接成中间含GUS基因的CN基因片段反向重复的序列，并插入到植物表达载体。通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草Xanthi-nc和HZNH，获得了32株转基因Xanthi-nc和25株转基因HZNH。转基因Xanthi-nc没有丧失对TMV的抗性，说明CN基因的沉默载体不能沉默N基因的表达。推测CN基因可能是HZNH中特有的抗性基因。 2、通过对EST数据库中进行搜索和拼接，得到了两条可能与抗病基因相关的基因片段。根据这两个片段设计引物，克隆出包含完整开放阅读框的两个基因NLRR1和NLRR2。两个新基因都不同程度地受到TMV、野火病和高盐的诱导表达。推测这两个新基因参与了烟草对生物和非生物胁迫的应答调控。 3、通过已知序列在EST数据库中进行比对和拼接，得到了一个可能编码双特异性激酶的片段。根据此片段设计引物，从HZNH中克隆到了一个新的基因NtDSK2。NtDSK2编码一个双特异性激酶。在HZNH受到TMV侵染之后，NtDSK2的表达量明显增加。所以NtDSK2参与了烟草对抗病应答的调控。