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目的:1.在Aβ诱导的星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的氧化应激损伤模型中,初步探讨Nrf2对Aβ诱导的氧化应激的抑制作用及DMF对Nrf2及其下游抗氧化应激因子如Nqo1和HO-1的调节作用。2.通过对星形胶质细胞Keap1、HDAC2因子和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞Keap1、CX3CL1因子的检测,初步探讨DMF在Aβ诱导的氧化应激条件下对Nrf2作用机制。方法:1.将大鼠星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分别与Aβ25-35共培养,诱导氧化应激反应。在大鼠星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中分别设立Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和Aβ+Si-nrf2+DMF组。Aβ组细胞给予Nrf2-conRNA转染。Aβ+Si-nrf2组细胞给予Nrf2-siRNA转染以敲低Nrf2基因的表达。以DMF(4uM)分别对Aβ组、Aβ+Si-nrf2两组细胞进行干预,干预后的细胞分别为Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2+DMF组。然后采用RT-PCR分别检测两种细胞中各Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和Aβ+Si-nrf2+DMF组的Nrf2、Nqo1、HO-1的mRNA表达水平。2.采用RT-PCR检测星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞各Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和Aβ+Si-nrf2+DMF组的Keap1 mRNA表达水平。采用Western blot检测星形胶质细胞各组的HDAC2蛋白表达水平和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞各组的CX3CL1蛋白表达水平。结果:1.在星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中,Aβ+Si-nrf2组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+DMF组Nrf2、Nqo1和HO-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。Aβ+DMF组较Aβ组Nrf2、Nqo1和HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。2.在星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y中,Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组Keap1 m RNA表达显著降低(P<0.05)。在星形胶质细胞中,Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组的HDAC2蛋白表达水平均明显下降(P<0.05)。在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中,Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组的CX3CL1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:1.Nrf2对Aβ诱导的氧化应激具有抑制作用。在Aβ诱导氧化应激的条件下,DMF可提高Nrf2的表达,增加抗氧化应激因子的表达。2.DMF可能通过抑制HDAC2的表达,提高Nrf2水平,从而减弱Aβ诱导的大鼠星形胶质细胞的氧化应激反应。DMF可能通过增加CX3CL1和减少Keap1的表达双重途径共同提高Nrf2水平,从而减弱Aβ诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5H细胞的氧化应激反应。