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目的:研究阿司匹林(Aspirin)体外抑制U251胶质瘤细胞的作用及其机制,探讨自噬在Aspirin诱导的U251细胞死亡中的作用。方法:用不同浓度的Aspirin处理人胶质瘤细胞株U251细胞,采用MTT法观察药物对人胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测U251细胞周期分布的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测U251细胞的凋亡;应用MDC荧光染色检测自噬的发生,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3、LC3、Beclin1的表达。提取U251细胞的RNA,应用Real Time PCR方法检测LC3及Beclin1的mRNA表达。台盼蓝染色和3H-TDR观察用自噬特异性抑制剂3-MA阻断自噬后Aspirin抑瘤作用的变化。结果:Aspirin可明显抑制人胶质瘤细胞U251的增殖,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;Aspirin可使U251细胞阻滞在G2/M期;诱导细胞发生凋亡,下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达以及诱导Caspase-3激活体增加。MDC荧光染色结果显示,Aspirin给药后可诱导U251细胞发生自噬;Aspirin诱导U251细胞发生自噬时,自噬特异性蛋白MAP LC3、Beclin 1被激活,同时它们的mRNA水平与对照组相比也明显升高。用3-MA预先抑制自噬后与Aspirin单独给药组相比,Aspirin对U251细胞的抑瘤率增加。结论:Aspirin在体外对胶质瘤细胞U251有明显的抑制作用并可能是通过线粒体凋亡途径诱导其凋亡,自噬在此过程中发挥着一定的作用,用自噬抑制剂预处理使Aspirin对U251细胞的抑瘤率增加说明自噬在早期对胶质瘤U251细胞有保护作用。