【摘 要】
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为进一步探究灰褐牛肝菌（Boletus griseus）对重金属镉（Cadmium,Cd）的富集机制,本文以产自云南省的野生灰褐牛肝菌作为研究对象,采集了云南省5个地区的灰褐牛肝菌样本,探讨了灰褐牛肝菌菌体Cd含量与其生态性状以及生理抗性指标之间的关系,并从灰褐牛肝菌子实体内分离得到了一株具有较高Cd抗性的真菌,从内生真菌的角度解析了灰褐牛肝菌富Cd的作用机制,此外还研究了该株真菌对水体Cd的吸附
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为进一步探究灰褐牛肝菌（Boletus griseus）对重金属镉（Cadmium,Cd）的富集机制,本文以产自云南省的野生灰褐牛肝菌作为研究对象,采集了云南省5个地区的灰褐牛肝菌样本,探讨了灰褐牛肝菌菌体Cd含量与其生态性状以及生理抗性指标之间的关系,并从灰褐牛肝菌子实体内分离得到了一株具有较高Cd抗性的真菌,从内生真菌的角度解析了灰褐牛肝菌富Cd的作用机制,此外还研究了该株真菌对水体Cd的吸附行为。研究结果如下:1.从5个地区采集到57个具有正常生态性状的灰褐牛肝菌样本,菌体Cd含量为6.22-48.73mg/kg（干重）;菌体超氧化物歧化酶（SOD）活性为180.70-211.92U/g（鲜重）,过氧化物酶（POD）活性为4.00-91.50U/g（鲜重）,过氧化氢酶（CAT）活性为0.00-234.15U/g（鲜重）,谷胱甘肽（GSH）含量为216.00-950.40μmol/g（鲜重）。进一步通过相关性分析发现,具有正常生态性状灰褐牛肝菌菌体Cd含量与其CAT活性存在着显著正相关的关系（R=0.334,p＜0.05）,表明CAT可能是子实体耐受高镉胁迫的重要因素。2.采样中,发现并确认异常生态性状的灰褐牛肝菌,其具体表现为:子实体呈椭圆形,无明显菌柄和菌盖,子实体大而坚实。同时采集同一生长地的14组正常和异常生态性状的灰褐牛肝菌样本。经测定,异常生态性状的灰褐牛肝菌Cd含量为10.81-49.29mg/kg,均值为29.75mg/kg（n=14）,正常性状的子实体Cd含量为13.71-43.40mg/kg（n=14）,均值为25.38mg/kg。统计分析表明,14组样本中有9组异常性状子实体Cd含量显著高于同组正常性状Cd含量（t检验,p＜0.05）,异常子实体Cd含量均值显著高于正常子实体Cd均值（t检验,p＜0.05）。此外测定了异常生态性状灰褐牛肝菌的SOD、POD、CAT活性以及GSH的含量,通过进一步相关性分析发现,异常生态性状灰褐牛肝菌Cd含量与POD酶活性存在着显著正相关的关系（R=0.558,p＜0.05）。3.从灰褐牛肝菌子实体中分离得到一株内生真菌,经ITS基因序列鉴定为金孢菌寄生菌（Hypomyces chrysospermus）。经测定,该株真菌在Cd初始浓度为200 mg/L的培养基中仍可生长,表现出较强的Cd抗性,命名为金孢菌C200。研究表明,在不同Cd初始浓度培养基中,Cd添加可促使菌株C200发酵产酸,未添加Cd培养5d后培养基p H值下降了1.43,Cd添加为80 mg/L时,培养基p H值下降了2.43;在菌丝体内检测到苹果酸、琥珀酸两种有机酸,两种有机酸含量都随着镉初始浓度的升高呈现“低促高抑”的现象,并在20mg/L时达到最大值;菌丝体对Cd的生物吸附最高可达10.03 mg/g（干重）,表现出很强的镉吸附能力。此外测定了该株真菌在不同Cd初始浓度培养条件下的SOD、POD、CAT活性以及可溶性蛋白、GSH的含量,结果表明Cd浓度的增加对菌株C200的各种生理抗性指标都有不同程度的激活作用。4.利用金孢菌寄生菌C200制得吸附剂并研究其对水体中镉的吸附行为,得出最佳吸附条件:p H6.0,吸附剂用量2g/L,吸附时间600min,镉初始浓度60mg/L。结果表明其对Cd的吸附更符合Langmuir等温平衡模型和拟二级动力学模型,为单分子层吸附,以化学吸附为主,对水体中镉的吸附是优惠型吸附。
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