【摘 要】
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背景及目的:肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,是许多国家癌症发病和死亡的首要病因,近几十年更是呈现上升状态。肺癌具有高发病率与死亡率,但是其治愈率极低,因此对肺癌进行早期诊断与筛查十分关键,但相关研究有待进一步的深入。近期研究发现在肺癌早期,血液DNA中能检测出异常DNA甲基化,并且具有较高的敏感性和特异性。环境污染与肺癌的发生相关,云南省宣威市是我国肺癌高发地区,该地区煤烟污染严重,生活在宣威的人
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背景及目的:肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,是许多国家癌症发病和死亡的首要病因,近几十年更是呈现上升状态。肺癌具有高发病率与死亡率,但是其治愈率极低,因此对肺癌进行早期诊断与筛查十分关键,但相关研究有待进一步的深入。近期研究发现在肺癌早期,血液DNA中能检测出异常DNA甲基化,并且具有较高的敏感性和特异性。环境污染与肺癌的发生相关,云南省宣威市是我国肺癌高发地区,该地区煤烟污染严重,生活在宣威的人群长期暴露于煤烟污染中,是肺癌高风险人群,同时随着年龄的增加,宣威人群患肺癌的风险也存在着不同。因此,本文通过分析肺癌相关基因在云南省宣威市肺癌患者DNA甲基化水平,希望能够将DNA甲基化检测应用于肺癌早期检测中,同时能够为开发具有诊断价值的生物标记物提供参考依据。此外,分析宣威市不同年龄段人群的DNA甲基化水平,希望能够探究肺癌相关基因DNA甲基化与年龄的相关关系,为肺癌高风险人群的早期筛查做初步探究。方法:本文以65例宣威肺癌患者、176例宣威正常成人、44例宣威正常儿童、60例昆明正常成人为样本。对于所有样本首先提取血液DNA并进行重亚硫酸盐处理,之后基于8个肺癌相关基因——PTEN、RASSF1、APC、DLEC1、MGMT、WIF1、RUNX3、GSTP1,应用甲基化特异性实时定量聚合酶反应(q MSP)对所有样本进行DNA甲基化检测,计算DNA甲基化水平。首先,分析宣威肺癌患者与宣威正常成人的DNA甲基化水平,筛选出宣威地区的肺癌生物标志物,其次,比较宣威正常成人与宣威正常儿童、宣威正常成人组间的DNA甲基化水平,分析8个基因不同年龄段人群DNA甲基化水平。此外选取昆明正常成人,并与宣威正常成人的DNA甲基化水平进行比较。最后,结合年龄等临床信息,分析年龄等与DNA甲基化水平间的相关性关系。结果:比较宣威肺癌与宣威正常成人的DNA甲基化水平,PTEN、RASSF1、MGMT、RUNX3、GSTP1的DNA甲基化水平在两者间存在显著性差异。对宣威正常儿童与宣威正常成人的DNA甲基化水平比较,结果显示,PTEN、RASSF1、GSTP1基因间均存在显著性差异。最后,宣威正常成年人组间比较发现,PTEN、RASSF1、APC、MGMT、WIF1、RUNX3、GSTP1基因甲基化水平与年龄正相关。除此之外,我们还结合临床样本信息对宣威所有样本DNA甲基化水平进行分析,PTEN、RASSF1、MGMT、WIF1、RUNX3、GSTP1基因的甲基化水平与性别具有相关性。主要结论:1、PTEN、RASSF1、GSTP1、MGMT、RUNX3基因有望开发作为宣威地区肺癌生物标志物;2、PTEN、RASSF1、GSTP1基因的甲基化水平宣威肺癌高于宣威正常成人和宣威正常儿童,三组相互间存在显著性差异,推测PTEN、RASSF1、GSTP1基因对肺癌高风险人群检测有一定指示作用;3、综合分析后针对宣威地区推测PTEN、RASSF1、APC、WIF1、RUNX3、GSTP1基因甲基化水平与年龄相关。
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